ELISA試劑盒斑點(diǎn)ELISA方法的首要操作程序?yàn)椋?br />(1)載體膜的預(yù)處理及抗原包被 取硝酸纖維素膜用蒸餾水浸泡后，稍加單調(diào)進(jìn)行壓圈。將陰性、陽(yáng)性抗原及被檢查抗原適度稀釋后參加圈中，置37℃使硝酸纖維素膜*單調(diào)。每張7cm×2.3cm的膜通常可點(diǎn)加40－53個(gè)樣品，每個(gè)壓圈可加抗原液1－20μl。
(2) 封閉 將硝酸纖維素膜置于封閉液中，37℃感作15－30分鐘。封閉液多選用富含正常動(dòng)物血清、pH7.2或pH7.4的PBS。
(3) 加被檢血清 可直接在抗原圈上加，也可剪下抗原圈、置于微量板孔中，再參加必定量適度稀釋的待檢血清，37℃反響必定時(shí)刻，用洗刷液洗三次，每次1－3分鐘。洗刷液通常為必定濃度的PBS-Tween溶液。
(4) 加酶標(biāo)抗體，37℃反響必定時(shí)刻后，用洗刷液洗三次。
(5)顯色參加新鮮制作的底物液，37℃反響必定時(shí)刻后，去掉底物液，加蒸餾水洗刷中止反響。
(6) 作用斷定 以陽(yáng)性、陰惡血清作為對(duì)照，膜片基地呈現(xiàn)深棕赤色斑駁者為陽(yáng)性反響，否則為陰性反響。
ELISA試劑盒斑點(diǎn)ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)（Dot-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)） 與慣例的微量板ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)對(duì)比，Dot-ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)具有簡(jiǎn)練、節(jié)省抗原等利益，而且作用可長(zhǎng)時(shí)刻保留；但其也有缺少，首要是在作用斷定上對(duì)比片面，特異性不行。
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