手机版av在线_96精品国产aⅴ在线观看_中文字幕35页_国产亚洲成AV人片在线观黄桃_全黄性色大片_免费视频h

上海研生實業有限公司
初級會員 | 第10年

15201736385

原代細胞周期測定操作步驟

時間:2017/1/21閱讀:484
分享:

原代細胞周期測定操作步驟

 [實驗器材]

1.儀器

原代細胞倒置顯微鏡,CO2培養箱,普通冰箱,超凈工作臺,低速冷凍離心機,顯微數碼攝影系統.水浴鍋。

2.材料與試劑

(1)非無菌材料酒精棉球,離心管架,血細胞計數板,擦鏡紙,記號筆,廢液缸,甲醇·冰醋酸,Giemsa染液.秋水仙素,2×SSC液,30W紫外燈,水浴,飯盒。

(2)無菌材料和試劑輔料鑷,6孔細胞培養板,培養瓶,15ml離心管,長絲滴管,10ml刻度移液管.滅菌塑料吸嘴,10%BS培養液,添加有0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶消化液.無菌Hank’s液,1.0mg/ml.BrdU溶液,1mol/L HCl溶液。

(3)細胞材料懸浮細胞培養物,貼壁細胞培養物。

[操作步驟]

1.取對數期生長的單細胞懸液,以一定密度接種在培養瓶或培養孔中。

2.當培養細胞進入對數生長期時,向培養液中加入BrdU,使Z終濃度為10μg/ml。

3.培養44~54h后,加入秋水仙素,終濃度為0.1μg/ml。

4.繼續培養4~6h后,常規消化細胞至離心管中,原代細胞注意培養上清的漂浮細胞也要收集到離心管中。

5.常規染色體制片。

6.有細胞一面向下,將染色體玻片放在一飯盒中的玻璃支架上,加入2×SSC液以不超過標本表面為宜,然后在標本上覆蓋一張擦鏡紙,使紙的兩邊浸入2×SSC液中,以保持標本的濕潤。

7.將飯盒放在56℃水浴鍋中,濕育,上面用30W的紫外燈管6~10cm垂直照射30min。

8.棄去2×SSC液和擦鏡紙,立即用4℃左右的流水沖洗。

9.Giemsa液染色5~10min,流水沖洗,干燥后鏡檢。

10.鏡檢100個細胞的分裂相,統計M1、M2、M3、M4細胞期(對應前期、中期、后期和末期這4個細胞分裂時期)分裂指數。

11.根據下式計算細胞周期

細胞周期(Tc)=48/[(Ml+2M2+3M3+4M4)/100](h)

[注意事項]

1.秋水仙素的加入時機會因細胞的類型、生長速度有所差異。

2.原代細胞加入BrdU后應避光培養。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 欧美日韩精品成人网视频 | 中文无字幕一区二区三区 | 九一网站在线观看 | 日本亚洲国产黄www 香港三级日本三级韩国三级 | 亚洲高清无吗 | 国产成人综合自拍 | 蜜桃久久一区二区三区 | 中文字幕天堂av | 欧美视频1区| 国产成人精品午夜2022 | 大地资源在线观看官网第三页 | 唐人街探案1免费播放 | 天天干夜夜爽 | 久久夜色精品亚洲 | 三区四区在线视频 | 久久久乱码精品亚洲日韩 | 亚洲色成人四虎在线观看 | 北条麻妃中文字幕 | 免费不卡av网站 | 亚洲二区三区在线 | 69综合精品国产二区无码 | 免费视频18上在线观看 | 麻豆精品视频在线播放 | 欧美一区在线视频 | 97热在线观看 | 国产成人啪精品视频免费网站 | 亚洲一区天堂 | 免费又色又爽又黄的成人用品 | 中文日产幕无线码一区2023 | 亚洲第一成网 | 日韩欧美的一区二区 | 国产专区免费av无码 | 成人特黄a级毛片免费视频 色一乱一伦一图一区二区精品 | 日本看片一区二区三区高清 | 狠狠色婷婷久久一区二区三区91 | 中文字幕在线一区二区三区 | 日韩av高清在线 | 亚洲第一福利在线观看 | 一区二区三区高清在线视频 | 日韩欧美久久久久 | 91精品无毒不卡 |