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活細胞直接觀察方法

時間:2017/6/29閱讀:377
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(一)細胞系相差觀察和攝影

1.相差裝置的使用 相差裝置或顯微鏡都是由兩部分組成,相差聚光器和相差接物鏡。在每個相差接物鏡的光學系統中都有一個光環透鏡;在聚光器內有數個可轉換的相位板,一定倍數的接物鏡使用時需與相應的相位板一致。相差觀察時對照明要求嚴格,光軸要對正,視野照明光度需均勻。

2.操作步驟

(1)調好相位板,使聚光器相位板號與接物鏡放大倍數(相位板)相一致。

(2)抽取接目鏡,再更換輔助望遠鏡,移動輔助鏡筒并調整聚光器相位板,使視野中兩個大小一樣的光環必須相互吻合。

(3)細胞系再重新換上原接目鏡,即成相差圖像;當更換不同倍數接物鏡時,需按上述過程重新調節。

3.注意事項

(1)對培養瓶、皿要求:相差顯微鏡觀察要求底物平坦、質地均勻、透光度強;一般玻璃器皿凹凸不平,不適合做相差觀察和攝影,用質地均勻的塑料器皿培養較好。

(2)準備:觀察和攝影前,要擦凈培養瓶表面,切勿殘留污跡而影響透光度。

(3)調光:調整照明光的照明度及光軸,使視野照明均勻。對準光軸是顯微攝影的重要條件,否則不易獲得理想效果。

(4)細胞系在無自控攝像裝置初次拍攝時,應將放大倍數、照明強度和曝光等條件逐一記錄,再做一組不同曝光時間的試驗,顯影后選取組合,作為以后再拍攝時的標準。

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