手机版av在线_96精品国产aⅴ在线观看_中文字幕35页_国产亚洲成AV人片在线观黄桃_全黄性色大片_免费视频h

上海研生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

15201736385

破碎原代細(xì)胞的方法

時(shí)間:2017/7/27閱讀:239
分享:

破碎原代細(xì)胞是獲得細(xì)胞各個(gè)組分的*步,也是很關(guān)鍵步驟:破碎不充分,會(huì)影響細(xì)胞器產(chǎn)量;破碎過度,有時(shí)會(huì)破壞細(xì)胞器。破碎細(xì)胞一般是在低溫條件下,將細(xì)胞在等滲液中制備成細(xì)胞懸液,進(jìn)行破碎細(xì)胞使之成為各種細(xì)胞器及其包含物的勻漿。

(一)勻漿法

勻漿(homogenization)是Z常用的破碎細(xì)胞的方法,一般都要在冰上操作。較為經(jīng)濟(jì)的方法是使用玻璃勻漿器。手動(dòng)玻璃勻漿器由一根端部表面磨砂的玻璃桿和一個(gè)內(nèi)壁磨砂的玻璃套管組成。使用時(shí),先用鋒利的刀片把組織塊切碎,然后把碎塊加入套管中,用力移動(dòng)玻璃桿使組織細(xì)胞破碎。因?yàn)樵谘心サ倪^程中會(huì)摩擦產(chǎn)熱,引起蛋白變性,所以一般都在冰上操作,冰上操作還可以抑制細(xì)胞酶活性,防止降解。電動(dòng)玻璃勻漿器和手動(dòng)玻璃勻漿器原理和使用方法相似。

(二)高速組織搗碎機(jī)法

高速組織勻漿機(jī)有高速轉(zhuǎn)動(dòng)的電機(jī),可以帶動(dòng)鋼制轉(zhuǎn)頭高速旋轉(zhuǎn),從而剪切樣品、達(dá)到破碎細(xì)胞的目的,可以用于微量樣品的制備。使用時(shí)將待處理細(xì)胞懸于細(xì)胞裂解液中.加入到塑料離心管(因?yàn)榈额^速度過快,為防止碎裂,盡量避免使用玻璃試管)中,并放置于冰上,將組織勻漿機(jī)的探頭浸入離心管中,然后打開電源,緩慢調(diào)整旋轉(zhuǎn)速度,一般開機(jī)數(shù)十秒后.組織細(xì)胞即可被高速旋轉(zhuǎn)的探頭破碎。但不宜時(shí)間過長,以防高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生熱而導(dǎo)致分離物中的活性物降解。

(三)超聲波處理法

超聲波發(fā)生器能產(chǎn)生高強(qiáng)度的超聲信號(hào),經(jīng)換能器傳送至與之接觸的溶液中,由聲波形成沖擊和振動(dòng)而產(chǎn)生剪力,致使原代細(xì)胞破碎,一般體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞均可在短時(shí)間內(nèi)破碎,因超聲時(shí)可產(chǎn)熱,應(yīng)注意冰浴冷卻,生物大分子如核酸和酶對(duì)超聲敏感,一般不宜采用。如果提取蛋白、多糖等,可采用超聲法降解核酸。超聲法可以和勻漿法相結(jié)合,即先通過勻漿的方法破碎細(xì)胞,再通過適當(dāng)?shù)某曔M(jìn)一步裂解。

(四)化學(xué)裂解法

在細(xì)胞懸液中加入Titon X-100、NP-40、SDS、去氧膽酸鈉均可使細(xì)胞裂解,往往仍需機(jī)械法進(jìn)行輔助,方可在短時(shí)間內(nèi)使細(xì)胞*裂解,裂解后應(yīng)清除化學(xué)裂解劑,以防止干擾分析。這些化學(xué)物質(zhì)往往配制成細(xì)胞裂解液。

(五)反復(fù)凍融法

可將細(xì)胞懸浮于細(xì)胞裂解液在一70℃或液氮中冷凍后,迅速于37℃融化,經(jīng)3—4個(gè)凍融周期.可使原代細(xì)胞破碎。如果結(jié)合超聲法,一般來說效果會(huì)更好。

會(huì)員登錄

×

請(qǐng)輸入賬號(hào)

請(qǐng)輸入密碼

=

請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 欧美精品无码一区二区三区 | 亚洲综合在线另类色区奇米 | 国产剧情乱偷 | 免费观看一级 | 久久久久国产精品一区二区三区 | 风韵丰满熟妇啪啪区老老熟女百度 | 中文字幕国内自拍 | 日本爆乳片手机在线播放 | 一性一交一伦一片A片庆乱码 | 国产情侣A片A毛片手机在线 | 国产成人午夜片在线观看高清观看 | momsxxxxfreemilf图片 | 成人片在线看 | 亚洲伦理网 | 国产首页天堂在线 | 无码AV波多野结衣久久 | 生活片特级 | 成人女人免费毛片 | 亚洲成A人无码 | 中文字幕国产视频 | 久久久精品一区二区毛片免费看 | 久久一精品 | 精品国产乱码久久久久久密桃99 | 天天操很很操 | 影院亚洲 | 女同一区二区三区 | 日韩性公交车上xxhd | 亚洲综合色婷婷六月丁香宅男大增 | 亚洲熟女色情网中文字幕 | 91精品999| 日本免费高清 | 我的妺妺h伦浴室无码视频 国产激情无码视频在线播放性色 | 欧美一个色资源 | 岛国av在线免费观看 | www.久久免费视频 | 国产午夜精品片一区二区三区 | 欧美老人巨大xxxx做受视频 | 超碰在线98 | 久久久久久久久亚洲精品 | 欧美性生交大片免费看a片 黄色录像a级片 | 千百橹av入口在线观看 |