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細(xì)胞株培養(yǎng)常用試劑

時間:2017/8/22閱讀:360
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一、 細(xì)胞株使用PBS 磷酸緩沖鹽溶液(一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用)

PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氫鉀(KH2PO4):0.27g,

磷酸氫二鈉(Na2HPO4):1.42g,

加去離子水約800mL充分?jǐn)嚢枞芙猓缓蠹尤霛恹}酸調(diào)pH至7.4,

Z后定容到1L

高溫高壓滅菌后置于4攝氏度冰箱保存待用。

(一般情況下,現(xiàn)配現(xiàn)用,易變質(zhì)暴露在空氣中)

二、 細(xì)胞消化液

0.25%胰酶-0.02%EDTA的配制

配方:100ml PBS,0.25g胰酶

步驟:

1、先配100mlPBS

2、稱胰酶0.25g

3、加入PBS中,低速攪拌 <4h冰浴中,或者4℃過夜低速攪拌0.5h冰浴中(儲存-20攝氏度冰箱中,使用保存4攝氏度)

4、調(diào)PH7.4

5、仍在冰浴中

6過濾,分裝,-20℃保存,4℃短期內(nèi)用完

Tip:低速很重要,機械攪拌對酶是一種沖擊,如果起沫,酶就變性了。低溫,防止酶失活

對難消化的細(xì)胞:在上述配方中,加入0.02g的EDTA(0.02%)

Tip:因為EDTA可以絡(luò)合Ca2 ,增加消化效力

三、細(xì)胞株培養(yǎng)基

人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC細(xì)胞

培養(yǎng)基RPMI 1640 培養(yǎng)基/DMEM培養(yǎng)基

肝癌細(xì)胞HepG-2細(xì)胞培養(yǎng)基

DMEM培養(yǎng)液(含100 U/ml-青霉素、100 U/ml鏈霉素、10%新生牛血清
EMSA探針-YY1(10μM)    30μl
生物素標(biāo)記EMSA探針-YY1(0.2μM)    200μl
EMSA突變探針-YY1(1.75μM)    60μl
EMSA突變探針-YY1(10μM)    30μl
EMSA探針-按需制備(1.75μM)    60μl
EMSA探針-按需制備(10μM)    30μl
生物素標(biāo)記EMSA探針-按需制備(0.2μM)    200μl
細(xì)胞株

 

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