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ATCC細胞活力檢測主要研究方向

時間:2018/7/31閱讀:248
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ATCC細胞活力檢測是檢測樣本中健康細胞的數目,這在優化細胞培養條件實驗(如未分化細胞培養、原代細胞培養等)中是必須的。主要研究方向包括膜損傷檢測、代謝活性檢測、DNA合成檢測等。

1.膜損傷檢測

使用染料對細胞進行染色(臺盼藍染色法),膜受損細胞將會染上色,清點未著色的健康細胞數目,從而檢測細胞膜的狀態。

另一種目前更常用的方法是對細胞培養上清液中的LDH酶活性進行檢測。Cytotoxicity Det.Kit PLUS(LDH) 是使用ELISA方法在96/384孔板中高通量地定量檢測細胞毒性。LDH是個穩定的細胞質蛋白,正常情況下在所有細胞中保持幾乎相同的濃度,因此可通過檢測受損細胞釋放的LDH,對細胞毒性/細胞活性進行簡單定量,從而判斷細胞膜的受損情況。配合使用Cell Proliferation Reagent WST-1能獲得更多細胞狀態。

此外,還可通過檢測上清液中的其他酶活方法來檢測細胞毒性,如堿性磷酸酶、酸性磷酸酶等。

2.代謝活性檢測

通過添加四咪唑鹽到細胞中可進行線粒體內酶代謝活性的測定。活細胞能將四咪唑鹽(如MTT)轉化成藍紫色結晶甲(Formazan),可通過分光光度計或酶標儀檢測,如:通過Cell Growth Determination Kit, MTT based(CGD1)進行ATCC細胞代謝活性的檢測。需要注意的是MTT法形成的Formazan 是水不溶性的,要加有機溶劑溶解,但在去上清操作時有可能會帶走小部分的Formazan,故有時重復性略差。因此又開發出很多種水溶性的四咪唑鹽類:如XTT、CCK-8(WST-8)等。

 Phospho-Pin1 (Ser16) 促腎上腺皮質激素釋放因子抗體

 phospho-PKA beta (Ser338) 促腎上腺皮質激素釋放因子抗體

 Phospho-PKA C (Thr197) 促腎上腺皮質激素ACTH(18-39)抗體

 phospho-PKA R2 (Ser96) 促腎上腺皮質激素ACTH (7-23)抗體

 phospho-PKA R2 (Tyr116) 促腎上腺皮質激素(1-39)抗體

 phospho-PKC (Thr500) 促尿鈉排泄肽前體C抗體

 Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641) 促卵泡刺激素受體抗體

 phospho-PKC beta 1/2(Thr500) 促卵泡刺激素抗體

 phospho-PKC delta (Thr505) 促進凋亡基因抗體
ATCC細胞

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