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小鼠ELISA試劑盒實驗條件的選擇

來源:上海滬峰生物科技有限公司    2015年02月26日 08:45  

小鼠ELISA試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本的含量。小鼠ELISA試劑盒是我公司ELISA試劑盒系列之一,也是我公司的主打產(chǎn)品,除了小鼠ELISA試劑盒還有人、大鼠(Rat)、猴(Monkey)、兔(Rabbit)、豬(Pig)、馬(Horse)、魚、雞、鴨、羊等其他ELISA試劑盒;產(chǎn)品種類齊全,價格實惠,操作簡單。

小鼠ELISA試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:

1 、固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

2 、 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃ 18~24小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。

3 、 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。

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