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分析干細胞周期的操作步驟

來源:上海莼試生物技術有限公司   2017年05月16日 15:24  

Ⅰ、干細胞樣品準備

準備以下一種或幾種樣品

A、組織單細胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細胞)

B、組織培養細胞

C、Ficoll-hypaque分離的單核細胞

Ⅱ、干細胞反應體系-DNA低滲緩沖液

檸檬酸三鈉 0.25g Triton-X 100 0.75ml Propidium iodide 0.025g

核糖核酸酶 0.005g

蒸餾水 250ml

我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數月后并無發現有任何染色活性的丟失

Ⅲ、染色

1、 每一個管子中放入1×106個細胞;

2、 樣品離心后盡可能*地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

3、 入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

4、 樣品于4℃下避光30分鐘或zui長不超過1個小時以備流式干細胞儀分析。

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