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人源細胞復蘇的操作步驟

來源:上海莼試生物技術有限公司   2017年11月09日 14:42  

人源細胞在實際操作中,凍存的細胞要進行復蘇,復蘇之后再培養傳代。復蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細胞內,再次形成胞內結晶損傷細胞。進行細胞復蘇的操作步驟如下:

(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。

(2)迅速放入38℃水浴中,并不時搖動,在1分鐘內使其*融化,然后在無菌下取出細胞。

(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養液后接種于培養瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養,次日更換一次培養液,繼續培養,觀察生長情況。若細胞密度較高,及時傳代。或無需離心直接將細胞加入瓶中,并加入培養基貼壁培養12~24小時后,充去上清,換入新鮮培養基繼續培養。

按照以上步驟復蘇的凍存人源細胞存活率高,生長及形態良好。
100923    1,2-dibutoxyethane    127-40-2    Diethylmalonylurea                    
100924    乙二醇二丁醚    fludrocortisone    difluoroacetic acid                    
100925    112-48-1    氟氫可的松    difluoromethane                    
100926    1,10-Decanediol    127-31-1    Diheptyl sulfide                    
100927    1,10-癸二醇    2,2-Dichloropropionic acid sodium salt    Dihydrokavain                    
100928    112-47-0    2,2-二氯丙酸鈉    dihydronicotinamide-adenine dinucleotide, disodium salt                    
100929    Undecylenic aldehyde    127-20-8    dihydroterpineol                    
100934    十一碳烯醛    N,N-Dimethylacetamide    Diiodomethane          人源細胞

 

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