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蛋白酶抑制劑分子生物學方法

來源:上海莼試生物技術有限公司   2018年05月24日 13:13  

蛋白酶抑制劑這是一類利用細胞因子的基因探針檢測特定細胞因子基因表達的技術。目前所有*的細胞因子的基因均已克隆化,故能較容易地得到某一細胞因子的cDNA探針或根據已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測細胞因子mRNA表達的方法多種多樣,常使用斑點雜交、Northern blot、逆轉錄PCR,細胞或組織原位雜交等。實驗的關鍵在于制備高質量的核酸探針和獲得合格的待測物(提取的mRNA樣品或細胞/組織標本)。核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標記物(如*等)標記并與目的基因互補的DNA或單鏈DNA、RNA。根據其來源可分為cDNA探針、寡核核苷酸探針、基因組基因探針及DNA探針等。其中cDNA探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點雜交及Northern blot,而RNA探針因穿透性好更適用于原位雜交。核酸探針技術的應用已經程序化,以cDNA探針為例主要包括:
①質粒DNA的提取;
②靶DNA的分離;
③靶DNA標記;
④待測樣品mrna的提取;
⑤標記cDNA探針對待檢樣品的雜交;
⑥放射自顯影或顯色分析。近年來出現的RT-PCR檢測特異性mRNA的方法也廣泛用于細胞因子研究領域。該法具有靈敏、快速等優點,甚至從1~10個細胞中就可檢出其中的特異mRNA。
研究人員注意到,這些細胞器的內含物決定著它們的特定功能,但是細菌微區室的蛋白外殼整體結構基本上都是一樣的。這種微區室蛋白外殼提供一種選擇性通透屏障,從而將在它的內部發生的反應與細胞的其余部分分隔開。蛋白酶抑制劑這能夠讓多步驟反應更加地發生,阻止不想要的干擾,并且對這些密封的反應可能產生的有毒化合物進行限制。

 囊性組織液體蛋白15IgG 人凋亡誘導因子(AIF)

 腦腸肽(一種新的生長激素釋放肽)IgG 人凋亡抑制因子(IAP)

 腦啡肽IgG 人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)

 腦啡肽酶IgG 人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)

 腦瘤相關基因IgG 人凋亡相關因子(FAS/CD95)

 腦鈉素IgG 人凋亡相關半*肽酶4(Casp4)

 腦鈉素IgG 人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1) 
蛋白酶抑制劑

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