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elisa試劑盒操作過(guò)程:
1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。
3、待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL。
4、隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本elisa試劑盒孔中(空白孔不加)參與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)符號(hào)的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6、全部孔參與底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7、全部elisa試劑盒參與停止液50μL,15min內(nèi),在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
elisa試劑盒注意事項(xiàng):
elisa試劑盒在2-8℃,運(yùn)用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這歸于
正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再運(yùn)用;實(shí)驗(yàn)中不必的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫
干燥)保存;濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照elisa試劑盒說(shuō)明書操作時(shí)樣本
現(xiàn)已稀釋5倍,終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度;嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)刻、加液量及次序進(jìn)
行溫育操作。全部液體組分運(yùn)用前充沛搖勻。
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