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漩渦混合器在土壤細(xì)菌菌群影響的分析使用

來(lái)源:上海蟻霖科學(xué)儀器有限公司   2021年11月08日 18:53  

莠去津(atrazine)又名阿特拉津,是一種常見(jiàn)的三嗪 類除草劑,化學(xué)名稱為2-氯-4-乙氨基-6-異丙氨基1,3,5-三嗪,是一種選擇性除草劑,可用于苗前苗后的作物。 莠去津具有高效、低毒、低成本、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn), 已成為受歡迎的除草劑之一,主要用于玉米、 高粱和甘蔗等作物田的雜草防除。由于其水溶性比較 大,殘留時(shí)間長(zhǎng),不易分解,長(zhǎng)期使用容易對(duì)地下水造成 污染和下茬敏感作物造成藥害,據(jù)報(bào)道有5%莠去津因降 雨和灌溉水而隨土壤流失,并流入整個(gè)流域的水生生態(tài) 系統(tǒng),目前被國(guó)際優(yōu)先控制的污染物之一。



1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器


試驗(yàn)地點(diǎn):吉林省公主嶺市吉林省農(nóng)業(yè)科技示范園 區(qū)(有機(jī)質(zhì)含量18.57 g/kg,pH值6.54)。 藥劑:38%莠去津懸浮劑(黑龍江省哈爾濱市利民農(nóng) 化技術(shù)有限公司),97%莠去津標(biāo)準(zhǔn)品 (中國(guó)上海TCI開(kāi)發(fā) 有限公司);乙腈(天津天泰精細(xì)化學(xué)品有限公司);石油 醚、氯化鈉、正己烷、無(wú) 水 硫 酸 鈉 ;Florisil (Dikma, Dikmapure);活性炭 (廣東翁江化學(xué)試劑有限公司);2× Taq Master Mix P111-03 (Vazyme);E.Z.N.ATM Mag-Bind Soil DNA Kit M5635-02 (OMEGA);Qubit3.0 DNA檢測(cè)試劑 盒 Q10212 (Life);MagicPure Size Selection DNA Beads EC401-03(Transgen)。 試驗(yàn)儀器:安捷倫1260-6460液相色譜-質(zhì)譜,臺(tái)式 離心機(jī)Pico-21(Thermo Fisher),漩渦混合器GL-88B(海門(mén)市其林貝爾儀器制造有限公司),混勻型干式恒溫器 TND03-H-H(深圳拓能達(dá)科技有限公司),電泳儀DYY6C型、電泳槽DYCZ-21(北京市六一儀器廠),Qubit誖3.0熒 光計(jì)Q32866(Invitrogen),PCR儀T100TM Thermal Cyeler (BIO-RAD),移液器Research plus 0.5-10ul(Eppendorf),噴 霧器(Matabi supper16)。



1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 田間試驗(yàn)


藥劑共設(shè)5個(gè)有效劑量0、855、1283、1710、2565 g/hm2 , 分別編號(hào)為1、2、3、4、5,施藥方式播后苗前土壤表面噴 霧,施藥時(shí)間為5月3號(hào)。小區(qū)面積30 m2 ,試驗(yàn)小區(qū)隨機(jī)排 列,4次重復(fù),每小區(qū)間設(shè)置1 m保護(hù)行。



1.2.2 檢測(cè)方法

質(zhì)譜條件:電離源模式:點(diǎn)噴霧離子化;電離源極 性:正離子模式(ESI+ );掃描方式:多反應(yīng)檢測(cè)(MRM);霧 化氣:氮?dú)猓混F化氣壓力:2.1×105 Pa;毛細(xì)管電壓:3500 V; 干燥器溫度:300 ℃;鞘氣溫度:300 ℃;干燥氣流速10 L/min, 鞘氣流速:7 L/min;母離子原子質(zhì)量為216.0;子離子源自 質(zhì)量:174.0/132.0;原內(nèi)碎裂電壓(V):120/120;碰撞氣能 量(V):15/20。 液相色譜條件:色譜柱Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18(100 mm×2.1 mm,3.5 μm);流動(dòng)相:乙腈-水(0.1% 甲酸+5 mmol/L乙酸銨);進(jìn)樣量:5 μL;流速:0.3 mL/min; 柱溫25 ℃。



1.2.3 土壤樣品采集測(cè)定及防效調(diào)查

分別在施藥后0、1、3、7、14、20、30、40、60 d采集各處 理0~15 cm耕層土壤150 g,于-20 ℃冷凍保存用于莠去 津沉積量檢測(cè),玉米出苗后40 d進(jìn)行雜草防效調(diào)查。分析土壤細(xì)菌設(shè)4個(gè)處理:1)施藥后0 d的空白土壤; 2)施藥后20 d的空白土壤;3)施藥劑量1710 g/hm2 20 d土 壤;4)施藥劑量2565 g/hm2 20 d土壤,采集土壤樣品50 g 于-80 ℃冷凍保存。



2 結(jié)果與分析

液相色譜-質(zhì)譜法測(cè)定了莠去津在土壤中沉積量, 莠去津線性方程y=5972.69x,農(nóng)藥峰面積與對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃 度之間呈良好線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)大于 0.9962。莠去津 的出峰時(shí)間為8.766 min。土壤添加水平分別是0.01、 0.05、0.5 mg/kg,莠去津的回收率范圍為91.6%~103.4%, 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為1.6%~17.9%,該方法的準(zhǔn)確性及 精密度能夠滿足農(nóng)藥殘留分析要求。莠去津在北方玉米黑土中的土壤沉積量測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)圖1。從圖1中可以看出:不同施藥量黑土中原始沉積 量為1.390~3.811 mg/kg,40 d玉米黑土的沉積量分別為 0.123、0.143、0.209、0.336 mg/kg。一級(jí)動(dòng)力學(xué)方程分別為 C=1.1817e-0.046t 、C=1.456e-0.05t 、C=2.0783e-0.056t 、C=2.866e-0.055t ,半衰期9.1~13.4 d,60 d消解率均達(dá)90%以上,收獲期各 施藥劑量的黑土中均未檢測(cè)出莠去津含量。可以推斷出當(dāng)土壤的藥效沉 積量為0.209 mg/kg時(shí),對(duì)闊葉雜草的防治效果可以保證 在80%以上,對(duì)禾本科雜草的抑制效果也可以達(dá)到40% 以上,對(duì)進(jìn)一步研究減量增效的提供了理論依據(jù)。



3 結(jié)論與討論

莠去津有效施藥量為1710 g/hm2 ,40 d土壤沉積量為 0.209 mg/kg,對(duì)北方黑土玉米田常見(jiàn)的闊葉雜草的防效 達(dá)91.9%,對(duì)禾本科雜草的抑制效果達(dá)44.3%。高通量測(cè) 序分析了莠去津施藥有效劑量1710、2565 g/hm2 對(duì)北方 玉米黑土原有菌群豐度影響,其中對(duì)一些土壤中有益菌 群影響較大,例如噬細(xì)胞菌門(mén)(Cytophagia)、慢生根瘤菌屬 (Bradyrhizobium)、新根瘤菌屬(Neorhizobium)、中慢生根瘤 菌屬(Mesorhizobium)等,都隨著土壤中莠去津的有效成 分的增加而表現(xiàn)出抑制的作用,噬細(xì)胞菌可以分解土壤 中的纖維,可以降解秸稈等纖維組織,恢復(fù)土壤質(zhì)量,改 善土壤結(jié)構(gòu),提高土壤肥力;慢生根瘤菌、新根瘤菌和中慢生根瘤菌都屬于根瘤菌的一類,都可以與豆科植 物的根部組織建立起共生固氮系統(tǒng),同時(shí)根瘤菌群可 有效的減輕土壤中金屬的毒性,提高土壤微生物生物 量、酶活性、全氮、速效磷和土壤有機(jī)質(zhì)含量。因此在保 證防效的基礎(chǔ)上,同時(shí)使北方玉米黑土中的原有菌群影 響達(dá)到最小,最終的推薦莠去津北方玉米黑土土壤的使 用有效劑量為1710 g/hm2 。



 


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