人血吸蟲抗原ELISA試劑盒操作步驟:

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

WM35, 人黑色素瘤細胞

BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株

U-2 OS, 人骨肉瘤細胞

WM451, 人黑色素瘤細胞

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞

UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌

Hela, 人宮頸癌細胞系

HNE2, 人鼻咽癌細胞系

SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞

HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細胞

Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系

ACHN, 人腎細胞腺癌細胞

JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系

BPH-1, 人前列腺增生細胞

RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系

Ca Ski, 人宮頸癌細胞

MCF-7 [MCF7], 人乳腺癌細胞系

Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

GBC-SD, 人膽囊癌細胞

5637, 人膀胱癌細胞

CNE1, 人鼻咽癌細胞系

HT-29, 人結(jié)腸癌細胞

T24, 人膀胱癌細胞

5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細胞系

HCT116, 人結(jié)直腸癌細胞

LncaP, 人前列腺癌細胞

6-10B, 人鼻咽癌細胞系

lovo, 人結(jié)腸癌細胞

DU 145, 人前列腺癌細胞

Hep-2, 人喉癌細胞系