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一、實驗?zāi)康?br>1、了解紫外可見分光光度計的結(jié)構(gòu)、性能及使用方法
2、熟悉定性、定量測定的方法
二、實驗原理
紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry),又稱紫外吸收光譜法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry),它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波長范圍內(nèi)的吸收光譜。紫外吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價電子在電子能級間的躍遷,是研究物質(zhì)電子光譜的分析方法。通過測定分子對紫外光的吸收,可以對大量的無機(jī)物和有機(jī)物進(jìn)行定性和定量測定。
是一種劇毒物質(zhì),可以致癌,已經(jīng)被列入有機(jī)污染物的黑名單。但在一些藥品、食品添加劑、消毒液等產(chǎn)品中均含有一定量的。如果其含量超標(biāo),就會產(chǎn)生很大的毒害作用。在紫外光區(qū)的吸收波長λmax=270nm。對溶液進(jìn)行掃描時,在270nm處有較強(qiáng)的吸收峰。
定性分析時,可在相同的條件下,對標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品進(jìn)行波長掃描,通過比較未知樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的光譜圖對未知樣進(jìn)行鑒定。在沒有標(biāo)準(zhǔn)樣品的情況下,可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)譜圖或有關(guān)的電子光譜數(shù)據(jù)表進(jìn)行比較。
定量分析是在270nm處測定不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光值,并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再在相同的條件下測定未知樣品的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可得出未知樣中的含量。
三、儀器與試劑
1.紫外可見分光光度計
2.容量瓶(1000ml、250ml)
3.比色管(50ml)
4.吸量管(5ml、10ml)
5.(AR)
準(zhǔn)確稱取0.010g于200ml蒸餾水中,溶解后定量轉(zhuǎn)移到1000ml的容量瓶中,作為儲備液。
于5支50ml的比色管中,用吸量管分別加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液,用蒸餾水定容至刻度,搖勻。
四、吸收波長的選擇
在標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中任取一種,以水為參比,分別在波長200~300nm之間以10為間隔測定其吸收波長,在吸光度值附近以間隔2為單位測定,直至找到吸收波長。
五、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
在已篩選的波長下,以水為參比分別測定上述標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,畫出C-A曲線,寫出回歸曲線方程。
六、濃度的測定
在相同情況下,測定其吸光度。根據(jù)回歸曲線方程計算出待測濃度。
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