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紫外可見分光光度計測試數據不準確檢查的方法

來源:上海譜元儀器有限公司   2022年04月27日 08:43  

紫外可見分光光度計測試數據不準確檢查的方法

①試樣是否光解    由于紫外可見分光光度計紫外光照射樣品,致使試樣發生光化學反應,從而引起樣品的濃度變化,會使測試結果不準確。這種現象的發生時,應該注意對樣品進行避光保護,一般是用黑紙包住樣品或采用棕色器皿裝樣品。
②測試波長是否合適    由于測試波長不合適,可能會因為摩爾吸光系數不同,致使靈敏度不同,所以產生分析測試誤差。因此,要認真選擇測試波長。一般來說,要選擇吸收波長作為測試波長,可以保證得到較大的信號,從而提高性噪比,保證分析測試數據的可靠性。
③比色皿是否沾污  比色皿沾污是很重要的問題,有時測試熏差增大,就是比色皿沾污的結果。除數據不準外,有時,出怪峰、負峰,也是比色皿沾污所引起的。如比色皿沾污,可以用20W的玻璃儀器超聲波清洗30min,一般都可以解決問題。但是絕不能采用大功率超聲波來清洗比色皿,否則會損壞比色皿。目前國內外的各類比色皿,一般都是分為燒結或粘接兩種。不管是哪一種,只要用大功率超聲波清洗,肯定會毀壞比色皿。所以,使用者一定要認真對待比色皿沾污的問題。
④注意截止波長般不能選擇靠近截止波長附近作為測試點,因為靠近截止波長附近的信號可能很弱,儀器的檢測限不好,有時測不出結果,或者測試誤差很大。尤其是試樣的吸收波長位置,一定要選擇在比截止波長長的地方,千萬不能選擇在比截止波長短的地方,否則得不到測試結果。
⑤SBW是否合適  因為每個樣品都有自己的分析SBW,只有在SBW下才能得到最小的分析誤差。要檢查SBW是否有問題,可以不斷改變SBW,薑至信號峰不增加時為SBW。
⑥檢查掃描速度  因為掃描速度與噪聲是一對矛盾。當掃描速度過快時,噪聲會很大;而噪聲是主要分析誤差的來源,一般來講,有多大的噪聲,就會使測試結果增加多少誤差。。所以,當分析誤差太大時,應該檢查掃描速度是否合適;在要求分析誤差很小時,采用慢速掃描,在其他條件合適的時候,慢速掃描可以得到準確的數據。在作基線平直度(BF)時,慢速掃描更為重要。
⑦檢查儀器的噪聲  因為噪聲是主要分析誤差的來源,所以當分析誤差增大時,應該注意根據噪聲的測試方法,對儀器噪聲進行檢查測試。
⑧注意儀器條件的選擇  當分析誤差增大時,應該全面檢查儀器條件;如波長、雜散光、噪聲、基線平直度、SBW、掃描速度等。
⑨注意參比池的吸光度(A)值是否過大  一般來講,參比池的吸光度應在1以下,在O.6一o.9為。
⑩其他  我們知道,分析測試的數據不準確,有很多是非儀器因素引起的。例如,樣品的代表性(采樣、送樣或抽樣等)、樣品的消解(固體樣品的粉碎)、稱樣(天平誤差;一般分析天平檔次為l/10000時,讀數精度為O.1mg,稱量范圍>lOOmg,誤差<O.1%;檔次為1/1OOOOO時,讀數精度為O.Olmg,稱量范圍> lOmg,誤差<O.1%)、稀釋(量具誤差)、試樣過期、儀器條件的選擇、儀器安放的環境(周圍的電磁場干擾、
溫度、濕度等)。我們在分析過程中如果發現數據不準確時,應該嚴格地檢查這些非儀器因素引起的誤差,要充分注意到這些非儀器因素。有時,非儀器因素在分析誤差中占主要成分(大約可以占70%~75%)。

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