為了正確理解比耳定律，為了用好各類光吸收的分析儀器，使用者應從儀器學的角度，了解導致比耳定律偏離（即比耳定律產生誤差）的主要因素。下面將簡單討論這些因素。

1．非單色光引起的偏離
從理論上講，比耳定律只適用于單色光，但在實際工作中并非如此，根據儀器學理論，不可能從光學分析儀器上得到真正的單色光，只能得到波長范圍很窄的光譜帶。因此，進入被測試樣的光仍為在一定波段內的復合光。由于物質對不同波長的光具有不同的吸光程度，故在實際工作中即使用高檔的分光光度計，采用很窄的狹縫寬度（用波段很窄的復合光照射樣品），仍然會產生比耳定律的偏離。
2．雜散光引起的偏離
雜散光是紫外可見分光光度計、原子吸收分光光度計等光吸收類光譜儀器的主要分析誤差來源。雜散光產生的原因很多，最主要的是光柵、外光路和單色器內壁散射等原因產生雜散光，它使分析測試的吸光度變小，特別在高濃度時，雜散光會引起分析測試的數據變小，引起比耳定律的偏離。一臺紫外可見分光光度計儀器的雜散光80%來自光柵，同時，因為物質是由許多粒子組成，這些粒子會對入射光產生散射。并且隨著粒子濃度的增大，這些散射光的強度會增強，透射光強度會降低，使被測試樣的吸光度增大，從而引起比耳定律的偏離。另外，樣品等因素也是誤差的一個來源，由于不少物質在光的照射下會產生光化學反應、光致發光現象或熒光，這也將導致比耳定律的嚴重偏離。
3．噪聲引起的偏離
噪聲對于光學類分析儀器非常重要。噪聲會直接影響光譜分析儀器的信噪比，降低儀器的靈敏度。噪聲限制紫外可見分光光度計、原子吸收分光光度計儀器對樣品分析濃度的下限（檢測限）。噪聲主要來自儀器的電子學系統。一臺紫外可見分光光度計或原子吸收分光光度計的噪聲大，都會使低濃度樣品分析測試的吸光度值增大，從而偏離比耳定律。
4．光譜帶寬引起的偏離
光譜帶寬會直接引起比耳定律的偏離，這是國內外許多科技工作者不注意但又特別重要的問題。在紫外分光光度計中，不同的樣品，要求用不同的光譜帶寬來分析。不同的光譜帶寬，有不同的分析誤差。所以，在紫外光譜分析工作中，有一個選擇光譜帶寬的問題。對于原子吸收光譜儀器，同樣有一個光譜帶寬的選擇問題。這些都是光譜儀器的設計、制造、使用者們必須認真考慮的問題。
5．化學因素引起的偏離
在化學分析中絕大多數是基于被測定成分與試劑之間的反應，從而得到一定的反應產物。這個產物不一定是穩定的，有時還會繼續產生化學反應、溶劑效應，有時試劑中還有雜質等的干擾，這些都會引起比耳定律的偏離。
6．其他因素引起的偏離
除上述因素外，分析測試時的溫度也可引起比耳定律的偏離，一般低溫法可提高分析靈敏度就是這個原因。還有壓力、光學傳感器的非線性等，都是引起比耳定律偏離的原因。