液相色譜系統由高壓、進樣系統、溫度控制系統等組成,是利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。而其中輸液系統包括高壓泵、流動相貯存器和梯度儀三部分。高壓泵的一般壓強為l.47~4.4X10Pa,流速可調且穩定,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,這對提高分辨率、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的。流動相貯存器和梯度儀,可使流動相隨固定相和樣品的性質而改變,包括改變洗脫液的極性、離子強度、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(即使僅有一個基團的差別或是同分異構體)都能獲得有效分離。
為了能夠讓高效液相色譜儀色譜柱能夠為我們準確的提供實驗室分析結果。除了需要舉報高壓的意外還需要配備專門的過濾器等輔助設備。今天我們主要介紹液相色譜系統中的輸液系統部分要用到的那些輔助設備。
一、管道過濾器:
在高壓的進口及出口與進樣閥之間應安裝管道過濾器。高壓的活塞和進樣閥閥芯的機械加工精度非常高,微小的固體雜質進入流動相,都會導致其損壞。同時固體雜質積累在接頭上,會造成柱壓升高,使色譜柱不能正常工作。因此,管道過濾器的設置十分必要。
管道過濾器的濾芯采用不銹鋼燒結材料,孔徑約2~3um,耐有機溶劑侵蝕。若發現管道濾器堵塞,可將其浸入稀HNO3溶液中,在中超聲10~15min,即可將堵塞的固體雜質洗出,若清洗后仍不能達到要求,則應更換濾芯。
二、脈動阻尼器:
活塞往復泵輸出的壓力脈動會引起基線波動,可在高壓出口與色譜柱入口之間安裝一個脈動阻尼器(又稱緩沖器)來消除壓力脈動。
1、可調彈簧式脈動阻尼器:
可調彈簧式脈動阻尼器是的脈動阻尼器,由一根外徑約1.1~1.5mm、內徑0.25mm、長約5m的不銹鋼螺旋狀毛細管組成,利用撓性來阻滯壓力和流量的波動。毛細管內徑越小,阻滯作用越大。
這種脈動阻尼器制作簡單,阻尼效果好,但會引起輸液系統中一定的壓力損失。由于體積大,更換溶劑很不方便,不適于梯度洗脫。
2、三通式脈動阻尼器:
將可調彈簧式脈動阻尼器改成三通式,可避免壓力損失,阻尼效果更好。
3、波紋管式脈動阻尼器:
阻尼效果好,但體積大,更換溶劑很不方便,不適于梯度洗脫。
4、新式脈沖阻尼器:
新式脈沖阻尼器由內、外管組成,內管采用彈性材料,內、外管之間裝有已脫氣可壓縮的液體,內管的彈性和裝填液體的可壓縮性都可吸收輸液系統中的壓力波動。
這種阻尼器死體積小,適于梯度洗脫。
在輸液系統中,還應配備由壓力傳感器組成的壓力測量和顯示裝置及流動相流量測量裝置等。
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