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《污水生物毒性監(jiān)測技術(shù)規(guī)程 發(fā)光細(xì)菌急性毒性測試-費歇爾弧菌法》提到,樣品毒性水平的表征方法采用檢測結(jié)果中的15min發(fā)光抑制率H進(jìn)行評價。根據(jù)H大小將毒性等級分為3級,相應(yīng)等級分別為低度毒性風(fēng)險、中度毒性風(fēng)險、高度毒性風(fēng)險,分級方法如表1所示。中科院土壤研究所制訂的水質(zhì)毒性分級標(biāo)準(zhǔn)中,根據(jù)相對發(fā)光率的大小將毒性等級分為低毒、中毒、重毒、高毒、劇毒5個等級,如表2所示。
目前,市面上應(yīng)用泛的發(fā)光細(xì)菌有3種:明亮發(fā)光桿菌、費氏弧菌、青海弧菌,如圖1所示。其中,明亮發(fā)光桿菌和費氏弧菌為海洋菌,青海弧菌為我國發(fā)現(xiàn)的淡水菌。ZnSO-4·7H2O對3種菌種的EC50(單一化學(xué)物質(zhì)使抑光率達(dá)到50%時該物質(zhì)的濃度)最小的為費氏弧菌,費氏弧菌的靈敏度更高。
表3列出了明亮發(fā)光桿菌(P.phosphoreum)以及費氏弧菌(Vibriofischeri)等所涉的國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)。ISO11348的3個標(biāo)準(zhǔn),主要區(qū)別在于費氏弧菌的狀態(tài)不同:第1標(biāo)準(zhǔn)采用的是新鮮制備的費氏弧菌;第2標(biāo)準(zhǔn)采用的是液體干細(xì)菌;第3標(biāo)準(zhǔn)采用是凍干粉細(xì)菌。其中,ISO11348-3-2017是應(yīng)用泛的發(fā)光細(xì)菌生物毒性檢測國際標(biāo)準(zhǔn)。涉及青海弧菌的暫時沒有標(biāo)準(zhǔn),僅在《水和廢水監(jiān)測分析方法》第四版書籍中提到。
ISO11348-3-2017與GB15441—1995相比,主要有以下兩點區(qū)別:
(1)利用的發(fā)光細(xì)菌不同,且保存菌種的溫度不同,前者用的是費氏弧菌,保存溫度為-20℃;后者為明亮發(fā)光細(xì)菌,保存溫度為2~5℃;因此,對于需要長期保存的凍干粉而言,冷凍溫度越低越好。
(2)前者要求測定加入水樣前發(fā)光細(xì)菌的原始熒光強(qiáng)度,并根據(jù)對照試樣做出校正,避免了細(xì)菌樣品不均勻帶來的誤差影響。
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