“平臺效應”是指PCR后期循環產物累積趨于飽和,使原來以指數增長的速率變成平坦的曲線,同時出現非特異產物的大量增加的現象。下列因素可能與平臺效應有關:
(1)dNTP或引物的消耗量。
(2)反應物的穩定度(dNTP或酶)
(3)最終產物的阻化作用(焦磷酸鹽、雙鏈DNA)。
(4)非特異產物或引物二聚體與反應物的競爭。
(5)產物在高濃度時變性不全,影響引物的延伸。
(6)酶與PCR產物的結合,使酶分子減少。
合理的PCR循環參數,能最大限度地避免這些因素對產物擴增的影響。
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