1.定義 核糖體P蛋白是三種蛋白質P0、P1和P2的總稱,位于核糖體60S亞單位,經SDS-PAGE電泳確定其分子量分別為38kD、19kD和17kD。與核糖體內大多數堿性蛋白質相比,Pl、P2是酸性的,富含*,而*含量少。
2.特性 免疫電鏡顯示,三種P蛋白形成一五聚體[P1P2]:P0,P1和P2形成的雙二聚體經P2的氨基端與P0結合。
生物化學研究顯示P1/P2在核糖體多肽合成的三個階段:起始、轉位和終止中都起著重要的作用。Mac Connel等人選擇性去除核糖體中的Pl、P2,結果蛋白不能合成而*核苷三磷酸鹽的活性亦喪失。高滴度的抗—P血清Fab片段可*抑制體外蛋白質合成系統中球蛋白mRNA的翻譯。將抗核糖體P抗體顯微注射人培養的人類細胞,也可抑制蛋白質的合成。
三種P蛋白的共同抗原決定簇位于羥基端高度保守部分,為11個氨基酸組成的線性表位。三種蛋白質羧基端氨基酸序列相似,氨基端則不同。
3.來源 60S核糖體亞單位可由蔗糖梯度離心,從幾乎所有的真核細胞都能得到。常用制備來源是鼠肝、兔網織紅細胞。雖然核糖體粗提物也可用于蛋白質印跡(免疫印跡)的檢測,但合成的P肽和P融合蛋白是ELISA法或放射免疫法檢測抗P抗體的佳來源。