新C18柱的活化及應用
飯相色譜柱也叫
C18色譜柱。在化學分析行業中得到廣泛的應用。
色譜柱的活化,說白了***是一個平衡的過程。不光是流動相要平衡,。有些時候我們還得對要測試的樣品對新柱子進行平衡。還有,測試分子量很高的多肽更為重要,因為分子量高的物質擴散速度很慢,平衡的話時間也相對比較長,平衡的方式比較簡單,樣品多進幾次,等到峰的面積和時間穩定在進行正式進樣測試。
假如是要加速平衡的時間,那***直接把前面要測試的樣品濃度加大或者不等洗脫完畢,連續多進樣多針,使用要測試的物質對新柱進行平衡,***能加快平衡時間了。
分子量多肽不高的話 我們一般選擇C18色譜柱***能很好的測定。也有用
離子交換柱,親水作用色譜柱,
水性C18色譜柱等。、
2、氨基柱柱效的恢復
氨基柱在進酸性樣品時,很傷柱子,如使用一段時間后,柱效降低,峰形改變,如何恢復?
氨基柱測酸性樣品,應該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化,導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。

建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。
3、色譜柱技術
色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。
液相色譜柱裝填實際上是有一定技巧和程序,可能還有一些運氣。一般使用高壓勻漿方法裝填。也***是能讓填料在溶劑內均勻地懸浮。然后用瞬間高壓壓實,這實際上用到了不同比例的勻漿液體,和合適的壓力。壓力太大,顆粒破碎,壓力太小,塔板數少。同時壓力需要穩定,不然分布不均,拖尾嚴重。同時還有頭上平整程度。套上套,***可以用了。
國內和國外相比,色譜柱的差距在于:國內公司以前都不會自己開發填料,一般買國外現成填料裝柱,買到的填料質量控制權不在自己手里。另外因為裝柱歷史短,經驗積累少,裝柱工藝也沒有******達到國外水平。另外,對色譜柱性能很關鍵的基礎材料-----裸硅膠,國產的還不過關,在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產品相比,差距很大。
4、色譜柱的清洗和保護
色譜柱如果被污染了。***把污染的地方取出然后裝上一些填料。因為如果你把色譜柱臟的地方掛掉了。那么微觀的理論塔板數***少了。如果你刮的不多的話,僅僅是看起來的表明層次。也許***是刮的臟污,所以你把問題解決了。但是今后還是會遇見相同的問題。再刮或者不小心刮的話可能會影響柱子的分析效果,。成都摩爾科學儀器有限公司提醒******還是裝一個預裝柱
一般工作完畢之后把色譜柱取下來的時候我們需要做什么?
答:對于一般的反相色譜柱,我們把他洗干凈之后放到純甲醇里面。然后用東西把柱子的兩頭都賽緊,避免里面的物質揮發。不需要做太多的其他保護