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如何選擇液相色譜儀流動相

來源:成都摩爾科學儀器有限公司   2025年03月24日 07:33  
一、選擇流動相應該考慮哪些方面
一個性能******的液相色譜流動相溶劑需要具有粘度低,檢測器兼容性好,容易得到純品和低毒性等特征。


選擇流動相的時候需要考慮下面幾個方面、


1、選擇的流動相不應該改變任何填料性質


低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質。堿性流動相不能用于硅膠柱系統。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。


2、純度


色譜柱的壽命與大量流動相通過有關,特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。


3、必須與檢測器匹配


使用UV檢測器時,所用流動相在檢測波長下應沒有吸收,或吸收很小。當使用示差折光檢測器時,應選擇折光系數與樣品差別較大的溶劑作流動相,以提高靈敏度。 


4、粘度要低(應<2cp):


高粘度溶劑會影響溶質的擴散、傳質,降低柱效,還會使柱壓降增加,使分離時間延長,******選擇沸點在100℃以下的流動相。


5、對樣品的溶解度要適宜


如果溶解度欠佳,樣品會在柱頭沉淀,不但影響了純化分離,且會使柱子惡化。


6、樣品可以很好的發揮回收作用


應選用揮發性溶劑


二、選擇流動相的幾點秘訣


1、從高到低


一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。


2、倍數翻倍規則


每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中,注意觀察各個峰的分離情況。


3、粗的變成細的,慢慢調整。
當樣品的分離達到一定的條件時。,需要把郵寄溶劑從百分之10調整到百分之5.并且慢慢下調。直到各個組分在分離的情況下不在改變。

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