實驗室使用液相的朋友都會有這樣一句話。:“液相虐我千百遍,我待液相如初戀。”
我的觀點是:你是否有hold住她,不只在于你要待她如初戀,更必須要深入地了解她,剖析她,才能***后做到從容地駕馭她。所以,接下來的成都摩爾科學儀器有限公司帶大家了解
液相色譜的原理,構造、操作方法,希望能幫到你哦。
液相色譜的核心是什么?
是的,色譜柱!因為分離是色譜的核心功能。
舉個例子,一個哥們,1903年用碳酸鈣作為分離基質,石油醚做流動相來分離植物色素,發現了色譜這個方法。他都沒有用到什么泵啊,進樣器啊,檢測器啊之類的東西。在這個實驗里面,重力***是泵,帶著流動相往前走;樣品直接放置的“柱”頭;眼睛***是檢測器,分辨不同顏色的條帶。
絕大多數現代的
色譜柱里面是細小的硅膠小球,小球的表面布滿了C18或者C8的鏈。碳鏈根據不同化合物的親水性不同,對化合物的吸附能力不同,所以在流動相的帶動下,不同化合物跑出色譜柱的時間也不一樣,從而完成分離。
現代的色譜柱里面的硅膠小球顆粒很小(5um),導致色譜柱比較致密,光靠重力流動相是流不過柱子的,所以需要有一個泵把流動相打過去。色譜柱的硅膠小球越密,把流動相打過去需要的力量越大,這***是為什么2um的小粒徑柱的出現,直接讓液相從HPLC發展到UPLC的原因。因為hplc已經沒有足夠的力量把流動相打過那么致密的柱子了。(為啥填料粒徑越來越小呢?我們后面會專門有一段來解釋的。)
有了泵把流動相打過色譜柱,他們***形成了一個高壓的體系,在這個體系里面,怎么引入要分析的樣品,又不中段流路、破壞這個高壓體系呢?聰明的工程師們想出了各種辦法,制造了手動進樣器和自動進樣器。色譜柱對樣品的分析,受溫度的影響很大。所以我們***把色譜柱放在一個可以控制溫度,保持恒定溫度的一個盒子里,***是
柱溫箱了。
我們要分析的樣品,我們的眼睛都看不見的(而且色譜柱,管線都沒有透明的),所以我們需要在色譜柱后面,放一個裁判,幫我們記錄不同化合物跑出來的時間以及出峰的大小,這***是檢測器了。

上面***是一個完整的液相了:有提供流動相前進動力的泵,有負責將樣品引入系統的進樣器,有負責給色譜柱溫暖呵護的柱溫箱,還有色譜柱后面站著的,手拿計時器和計數器的裁判—-檢測器。***后裁判把記錄的結果電腦上的一個叫做工作站的人,他再做數據的計算和存儲。
看了這篇文章是不是***覺得
液相色譜不在那么難了。