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液相色譜分析中如何才能提高分離度?

來源:成都摩爾科學儀器有限公司   2025年03月25日 07:15  
液相色譜分析中如何才能提高分離度? 
柱效(Efficiency)
.折射出色譜柱柱子的性能,柱子效果越好,分離的條件***越好,在其它恒定的條件情況下,如果塔板數(shù)增加了一倍,但是分離度大約只會提高百分之40%。我們在操作過程中,可以通過下面的方法來提高色譜分析的效果。首先,需要使用長的色譜柱柱管或者拿2個色譜柱來反應色譜柱的性能。柱子的效率越高。說明分離條件***越好,還有一個***是使用粒徑填料的色譜柱,但是這個需要耐更高壓力的液相色譜系統(tǒng)。所以兩者之間一對比,后面的情況更為可觀。
選擇性(selectivity)


是指色譜柱-流動相體系分離兩個化合物的能力。選擇性主要與固定相、流動相組成以及柱溫等因素有關,與保留值也密切相關,其中固定相和流動相組成影響較大。以***常見的反相模式為例,反相柱(包括C18、C8、PH等)是以分配作用對化合物進行保留的,不同化合物的分離是基于它們在鍵合相與流動相中分配系數(shù)的差異,如果兩種化合物的水溶性、在烷烴-水體系的分配系數(shù)等方面存在明顯差異,那么這些化合物通常是能夠利用反相柱達到分離;PH柱對具有苯環(huán)的化合物具有特殊保留。正相模式下,硅膠柱、胺基柱、氰基柱與帶有極性基團的化合物之間存在極性相互作用,對化合物的基團具有選擇性,常常用于結構類似物、異構體化合物的分離。流動相方面,降低流動相的洗脫強度通??梢栽龃蠓蛛x度;而有機溶劑類型也會影響分離,比如反相條件下,乙腈和甲醇的選擇性***存在很大差異,這種差異需要在實踐中摸索,但無論如何,多種溶劑類型帶給我們更多的實現(xiàn)分離的可能。
容量因子
隨著容量因子k的增大,分離度也隨之增加,這種影響在k值較低時非常明顯,當k值大于10時,k值增加對分離度的影響***不再顯著,這***告誡無原則地提高k值以增大分離度是沒有意義的。增加鍵合相密度能夠提高k值;另外改變鍵合基團類型也能改變k值,比如在反相色譜中,隨著鍵合相碳鏈長度的增加,k值逐漸增大。
分離度,指相鄰兩峰的保留時間之差與平均峰寬的比值.也叫分辨率,表示相鄰兩峰的分離程度.
R越大,表明相鄰兩組分分離越好.一般說當R<1時,兩峰有部分重疊;當R=1.0時,分離度可達98%;當R=1.5時,分離度可達99.7%.通常用R=1.5作為相鄰兩組分已******分離的標志.當R=1時,稱為4σ分離,兩峰基本分離,裸露峰面積為95.4%,內側峰基重疊約2%.R=1.5時,稱為6σ分離,裸露峰面積為99.7%.R≥1.5稱為******分離.《中國藥典》規(guī)定R應大于1.5.

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