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檢測elisa試劑盒標本的處理方法

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    2017年10月13日
關鍵詞
檢測elisa試劑盒
上傳者
上海撫生實業有限公司
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資料簡介

檢測elisa試劑盒標本的處理方法:
(1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
(2)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
(3)尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心,胸腹水、腦脊液參照實行。
(4)細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(5)組織標本:切割標本后,稱取重量,加入一定量的PBS,PH7.4,用液氮迅速冷凍保存備用,標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。
操作步驟:
1. 加規范品:在酶標包被板上設規范品孔,順次參加不一樣濃度的規范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
2. 加樣:別離設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其他各步操作一樣)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,悄悄晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗刷:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗刷液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗刷:操作同5。
9. 顯色:每孔先參加顯色劑A50μl,再參加顯色劑B50μl,悄悄震動混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 停止:每孔加停止液50μl,停止反響(此刻藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加停止液后15分鐘以內進行。
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