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普通抗體的五個種類2021/10/20
按照不同的分類方式,抗體可以分成許多類型,目前常用的分類方式將普通抗體按理化性質和生物學功能分為IgG、IgM、IgA、IgE、IgD五類。--IgG是血清中一種主要的Ig,含量占總Ig的65—75%左右。廣泛分布于組織液中,血管內、外間隙中分布量大體相當。是機體抗感染的一種重要物質。--IgM是成熟胎兒合成的第一類Ig,也是在感染或免疫后最早產生的Ig,5類Ig中IgM*,故其細胞毒活性和細胞溶解活性也*。天然的血型抗體是IgM,有些自身抗體如抗磷脂抗體、RF等也屬于IgM。胎兒臍血中IgM抗
ELISA試劑盒有高特異性優勢三個具體表現2021/10/12
ELISA試劑盒實驗因多重優勢在免疫學檢驗中得到廣泛應用,急速發展。那么它所擁有的高特異性優勢有哪些呢?1.特異性:指試劑正確檢定不存在的被檢物質的能力(無假陽性),取決于包被抗原(體)及標記抗原(體)的純度及特異性。2.穩定性:試劑在規定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標,直到其質量指標開始下降為止,通常認為37℃每穩定一天相當于4-10℃保存一個半月。3.簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在
DNA復制酶系作用順序2021/10/08
1.拓撲異構酶使DNA超螺旋結構解開,形成其基本的雙螺旋結構。2.解鏈酶使DNA雙螺旋結構解開,堿基間氫鍵斷裂,形成兩條單鏈DNA,構成”復制叉“。3.單鏈DNA結合蛋白單鏈DNA結合蛋白結合在兩條單鏈DNA上,穩定單鏈DNA,阻止DNA復性,避免被核酸酶降解,便于復制子代DNA。4.引物酶是一種依賴DNA的RNA聚合酶,該酶以DNA為模板,聚合一段RNA短鏈引物,以提供自由的3'-OH,形成引發體,使子代DNA鏈能夠開始聚合。5.DNA聚合酶由于DNA聚合酶只能以5'→3'方向聚合子代DNA鏈
解析了解細胞培養基2021/09/27
常見問題解答:Q:針對不同細胞,細胞培養基配方一樣嗎?如何獲知呢?A:不同細胞的培養基是不同的。一般ATCC購買的細胞,針對不同細胞株,會有詳細介紹,包括生長的狀態圖、培養基的類型等。如人源乳腺癌細胞MCF-7細胞一般為1640,人源肺癌細胞A549可用DMEM培養基。Q:培養基為什么一般都是偏紅色?A:因為培養基加了酚紅來顯示顏色,指示pH范圍為6-8,顏色會由黃變為紫紅。這是為了我們能更直觀觀察培養液的變化,如變黃,則代表偏酸,偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說,細胞吸收營養后,變黃后就暗示我們
化學試劑的貯存及貯存環境管理2021/09/24
化學試劑對于實驗室的作用及為重要,只是因為它的特殊性,對于它的管理也是實驗室管理工作的重中之重。那么該怎么管理才能做好化學試劑的管理呢?下面關于化學試劑(包括特殊的化學試劑)的貯存及貯存環境。一、化學試劑的貯存環境1、一般的化學試劑室應保持陰涼、避光,以防止因為陽光照射及室溫偏高而造成的試劑變質、失效等問題。2、化學試劑室內應嚴禁明火,并且要準備好消防滅火設施器材。3、化學試劑貯藏室室溫應保持以5-25攝氏度。4、化學性質或防護、滅火方法等會相互抵觸的化學危險品,不得在同一柜內存放。5、危險品的
ELISA 測定法中用到的常規樣本制備指南2021/09/07
該指南適用于制備ELISA測定法中用到的常規樣本,而*的樣品制備程序可根據需測定靶標及測定方法法作相應調整。選用新測定方法時,建議查閱相關文獻選擇與您樣本相似的實驗步驟作為參考。細胞培養物上清液將培養基移至離心管,4℃,1,500rpm離心10分鐘。立即進行上清液的分裝(血清)并在-80℃下保存樣品。盡可能減少反復凍融次數細胞提取物將組織培養板放置在冰上吸出培養基并用預冷PBS輕輕洗滌細胞一次吸出PBS,加入100mm培養板加入0.5ml*提取緩沖液收集細胞至在傾斜板中,然后移至經過預冷的離心管
轉錄中介因子1-βELISA試劑盒標本要求2021/09/02
一、標本要求1.血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2.血漿:根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3.尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4.細胞培養上清:檢測分
細胞樣品的保存操作步驟2021/08/24
一、操作步驟:1、在37℃5%CO2條件下將細胞加在處理的載玻片上,用培育基培育,時間通過預試驗確定;2、細胞長好后,用洗刷液洗2分鐘×3次,室溫下將其放入細胞固定液中固定30-60min,蒸餾水洗刷;3、室溫下用洗刷液充沛洗刷固定細胞,(干燥后-20℃冰凍保存2周以上)4、雜交前將固定的細胞進行如下處理;順次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脫水每次5min,用二甲苯洗刷,除掉殘留脂質順次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,進行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;5、在37℃用胃蛋
介紹三種細胞培養培養條件2021/08/18
細胞培養培養條件:一、動物細胞培養:在所有的細胞離體培養中,最困難的是動物細胞培養。下面是它所需要的特殊條件。⑴血清:動物細胞離體培養常常需要血清。常見的是小牛血清。血清提供生長必需因子,如激素、微量元素、礦物質和脂肪。有一天人們真正學會了配制和血清一樣的培養液,那時血清才可被取代。在這里,血清等于是動物細胞離體培養的天然營養液。⑵支持物:大多數動物細胞有貼壁生長的習慣。離體培養常用玻璃,高速冷凍離心機塑料等作為支持物。⑶氣體交換:二氧化碳和氧氣的比例要在細胞培養過程中不斷進行調節,不斷維持所需
小鼠線粒體DNA通用PCR試劑盒反應五要素2021/08/04
需要自備的器材:1.方法儀器:分析天平、離心機、熒光PCR擴增儀、組織研磨器、-20℃冰箱、可調移液器(2µL、20µL、200µL、1000µL)。2.耗材:熒光PCR專用反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5mL經焦碳酸二乙酯(DEPC)水處理的滅菌離心管、吸頭(10µL、200µL、1000µL)、滅菌雙蒸水。反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知
免疫熒光試劑盒操作步驟2021/07/28
免疫熒光染色試劑盒(ImmunolFluorenceStainingKit)系列是Elabscience®開發的用于細胞或組織切片檢測免疫熒光染色的試劑盒。在有適當的一抗檢測特定的目標蛋白時,就可以使用免疫熒光染色試劑盒檢測到紅色、綠色或藍色等熒光。推薦Elabscience®的免疫熒光染色的試劑盒。操作步驟:1.免疫熒光染色的準備工作A.固定液的準備:推薦使用4%多聚甲醛作為固定液(E-IR-R113),或根據特定的一抗或樣品采用有效成分為乙醇、甲醇或其它類型的固定液。B.TBST工作液的準備
細胞傳代培育過程中的原則與注意事項2021/07/21
在生物醫學試驗中常常會用到細胞系,指原代細胞培育物經傳代成功后所繁衍的細胞群體。也指可長期連續傳代的培育細胞。細胞系是經過細胞傳代或續代培育是將細胞從現有的培育物分隔或分出來開端新的培育,并參加新鮮培育液來促進擴增的常用手法。可是細胞系與新分離的或原代細胞的培育條件相類似,但也有一些根本不同的:(1)每個細胞系需求其特定的成長因子混合物(2)與原代細胞比較,它們的成長需求更嚴密的監測,由于使它們無限成長的突變同時也會形成它們很快到達過度成長。因而,當細胞系成長到了簡直覆蓋整個培育器皿底部,也便是
elisa檢測試劑盒正確使用要點2021/07/16
雖然elisa檢測試劑盒看起來比較簡單,但實驗過程操作點的許多需要掌握操作步驟。如果稍有不慎,操作不合理的地方,會造成很多問題,ELISA試劑盒影響了檢測的精度,大大降低了測試質量。如花板,假陽性,全彩色,全彩色,顏色空間的低。下面介紹elisa檢測試劑盒正確使用要點:1.血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3.細胞上清液:1
蛋白酶K(Proteinase K)知識課堂2021/07/07
蛋白酶K在BSE的檢測中用來消化PrPc,用來區別致病的PrPsc,它的正確使用對檢測特異性和敏感性都有重要影響。概述:蛋白酶K是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活,該酶在較廣的pH范圍內(pH4-12.5)均有活性來源:源于白色念球菌(Tritirachiumalbum)反應條件:蛋白酶K在較廣的緩沖液pH范圍(pH4-12.5),溫度范圍(37-60℃),鹽濃度(如:3MGuHCl)或尿素(4M)條件下均有活性
菌種常用的孢子分離的三種方法2021/06/30
為了獲得某種真菌類藥材的純菌種,必須從其它微生物中分離出來,稱為菌種的分離。常用的孢子分離又可分為以下幾種方法:1.褶上涂抹法:選取新鮮、健壯、未開傘、未破裂的子實體,洗凈后用0.1%sheng汞或75%酒精表面滅菌2分鐘,然后連同培養基一起放入接種箱內,經福爾馬林熏蒸消毒12~24小時,再按無菌操作技術將接種環在子實體菌褶上涂抹,把涂抹后帶孢子的接種環在培養基上劃線接種,,最后置于25~28℃恒溫箱內培養,可得純菌種。2.孢子印采集法:取滅過菌的載玻片、試紙或黑布,置于新鮮、未開傘或未開裂的子
檢測實驗中七種常見微生物2021/06/23
在產品微生物檢測過程中,實驗員們會接觸到許多不同的微生物種類,小編就來總結下檢測實驗中常檢出的微生物。1.大腸菌群大腸菌群,它不代表某一個或某一屬細菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌。大腸菌群都是直接或間接地來自人和溫血動物的糞便。一般食品中大腸菌群超標,表示食品受動溫血動物的糞便污染,其中典型大腸桿菌為糞便近期污染,其他菌屬則可能為糞便的陳舊污染。人吃了大腸菌群超標的食物可能會導致:腸道傳染病、食物中毒等。2.霉菌霉菌,是絲狀真菌的俗稱,意即"發霉的真菌",它們往往能形成分枝繁
分享6個讓細胞活躍的訣竅2021/06/17
細胞但是許多生物學試驗的主角。如果細胞心境欠好,那么試驗的效果也不會好到哪兒去。如何讓細胞活躍?1.保證一切試驗室資料都無菌穿插污染是細胞培育的大敵。即使是輕微的污染,也或許毀了幾個星期的效果。因培育箱內溫暖潮濕,真菌極易成長,因而有必要留意定時清潔。此外,在將培育瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前,運用酒精擦洗潔凈,以防止污染。2.小心處理您的培育物細胞培育的脆弱性怎么著重也不為過。劇烈搖晃,或連續的溫度波動或許會對成長發生不利的影響。保證培育箱是水平的,溫度均一,且遠離電動儀器。此外,
提高ELISA的精確重現性解決辦法2021/06/09
免疫檢測法的精確性表現為單次實驗孔間(批內)的重復性和多次實驗之間(批間)的重復性。CV值高則表明精確度低,通常由以下兩個原因造成:移液技術和洗滌技術。移液技術1.移液時,槍頭應對準孔中央,避免接觸孔壁及底部。2.移液后輕輕晃動混勻試劑。3.如果您的樣品具有黏性,請預先潤洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時等待片刻使體積平衡后再取出。4.移液不充分或移液體積不均,說明移液器需要校正。必要時請檢查移液器并重新校正。5.加樣時,不同的試劑標準品和樣本間都要確保更換槍頭,避免交叉污染。6.確保使用合適的
實驗室器具清洗方法你知道嗎?2021/06/03
面對你天天打交道的實驗器具,他們是你的好伙伴,也是決定準確性的重要因素,它們的清洗就成為了一件極其重要的事情了。下面就不同器具的清洗方法做出說明:新玻璃儀器的清洗:1.自來水刷洗,除去灰塵。2.烘干、泡鹽酸:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀鹽酸中12小時以除去臟物、鉛、砷等物。3.刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干。4.泡酸、清洗:用清潔液(重鉻酸鉀120g:濃硫酸200mL:蒸餾水1000mL)浸泡12小時,然后從酸缸內撈出器皿用自來水沖洗15次,后蒸
培養細胞不貼壁的原因以及解決方法2021/05/28
培養細胞不貼壁的原因以及解決方法在培養細胞的時候,有的會出現細胞不貼壁的,到底是什么原因會出現這種情況呢?下面來講解一下!可能原因如下:1.胰蛋白酶消化過度2.支原體污染3.培養基pH值過堿(NaHCO3分解)4.細胞老化5.接種細胞起始濃度太低或太高解決方法:1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度2.分離培養物,檢測支原體。清潔支架或培養箱。如發現支原體污染,丟棄培養物3.使用無菌醋酸溶液調整pH值或充入無菌CO24.啟用新的保種細胞5.調節*接種細胞濃度
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