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人白細胞介素-11(IL-11)ELISA 檢測試劑盒說明書2012/02/23
人白細胞介素-11(IL-11)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:血清或血漿試驗原理:IL-11試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-11濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將IL-11和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-11的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
雞 (Chicken) 乙酰*酯酶 (ACHE) ELISA 檢測試劑盒說明書2012/02/22
雞(Chicken)乙酰*酯酶(ACHE)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標本:組織勻漿試驗原理:ACHE試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ACHE濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將ACHE和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ACHE的濃度呈比例關系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制
細胞培養(yǎng)常見問題和解決方法2012/02/17
問題1:培養(yǎng)液pH值變化太快可能原因(1)CO2張力不對(2)培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊(3)NaHCO3緩沖系統(tǒng)緩沖力不足(4)培養(yǎng)液中鹽濃度不正確(5)細菌、酵母或真菌污染建議解決方法(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2濃度,2.0g/L到3.7g/L濃度NaHCO3對應CO2濃度為5%到10%。(2)松開瓶蓋1/4圈。(3)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。加HEPES緩沖液至10到25mM終濃度。(4)在CO2培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Han
人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒實驗原理2012/02/16
英文名稱:HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISA1.采用雙抗體夾心法測定標本中人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISAKit水平。2.首先用純化的人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISAKitt抗體包被微孔板,制成固相抗體。3.然后往包被單抗的微孔中依次加入膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISAKit,再與HRP標記的膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISAKit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用
PCR實驗污染與對策2012/02/15
PCR反應的zui大特點是具有較大擴增能力與*的靈敏性,但令人頭痛的問題是易污染,極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生.一、污染原因1、標本間交叉污染:標本污染主要有收集標本的容器被污染,或標本放置時,由于密封不嚴溢于容器外,或容器外粘有標本而造成相互間交叉污染;標本核酸模板在提取過程中,由于吸樣槍污染導致標本間污染;有些微生物標本尤其是病毒可隨氣溶膠或形成氣溶膠而擴散,導致彼此間的污染.2、PCR試劑的污染:主要是由于在PCR試劑配制過程中,由于加樣槍、容器、雙蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染
流式細胞儀血小板分析2012/02/10
流式細胞儀血小板分析應用范圍通過分析信號傳遞、細胞骨架結(jié)構(gòu)、顆粒釋放、糖蛋白構(gòu)形、膜磷脂、與抗凝因子的結(jié)合和微粒形成,分析血小板活化,血小板對刺激物的反應性通過分析受激后表面結(jié)合蛋白觸發(fā)凝血鏈式反應和表面糖蛋白缺陷檢測,分析血小板止血功能的獲得性和遺傳性缺陷結(jié)合血小板大小,檢測血小板RNA含量,分析血小板成熟度,計數(shù)網(wǎng)織血小板發(fā)現(xiàn)血小板抗體,做定性和定量分析血小板分析的臨床應用血小板活化導致的血栓前綜合癥:如糖尿病、非免疫性血小板活化血管缺陷導致的血小板活化:如動脈粥樣硬化、急性心肌梗塞、血管成
細菌數(shù)量的測定方法2012/02/10
細菌數(shù)量的測定方法1、計數(shù)器測定法即用*進行計數(shù)。取一定體積的樣品細胞懸液置于*的計數(shù)室內(nèi),用顯微鏡觀察計數(shù)。由于計數(shù)室的容積是一定的(0.1mm3),因而根據(jù)計數(shù)器刻度內(nèi)的細菌數(shù),可計算樣品中的含菌數(shù)。本法簡便易行,可立即得出結(jié)果。本法不僅適于細菌計數(shù),也適用于酵母菌及霉菌孢子計數(shù)。2、電子計數(shù)器計數(shù)法電子計數(shù)器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過一個細胞,當一個細胞通過這個小孔時,電阻明顯增加,形成一個脈沖,自動記錄在電子記錄裝置上。該法測定結(jié)果較準確,但它只識別顆粒大小,而不
RIA常用的分離方法2012/02/09
1.第二抗體沉淀法其原理是用RIA反應中的試劑抗體(一抗)如豚鼠的IgG免疫另一種動物(如羊),制得羊抗豚鼠IgG血清(一抗)。RIA反應結(jié)束時,加入二抗,使其形成抗原-一抗-二抗的雙抗體復合物;但因一抗含量甚微,此復合物也少,不易離心分離,一般還需加入一定量的與一抗同種動物的血清或IgG,使其與二抗形成較大量的可見沉淀物,與雙抗體復合物共沉淀;離心后,即可有效地分離B和F。也可將二抗與某些顆粒固相物連接,制成固相二抗,分離B、F效果也好。2.聚乙醇(PEG)沉淀法PEG能非特異地沉淀抗原抗體復
酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)操作要點2012/02/04
1標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本可按常
移液器移液的兩種方法2012/01/13
移液之前,要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。一是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至*停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至*停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。zui后松開按鈕。二是反向移液法。此法一般用于轉(zhuǎn)移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉(zhuǎn)
*的用法用量2012/01/11
*基本信息【英文/拉丁名稱】:Dithranol【性狀】:*為黃色或淡黃棕色結(jié)晶或粉末,無臭。本品在氯仿中溶解,在冰醋酸中微溶,在乙醇中極微溶,在水中幾乎不溶。熔點本品的熔點為176~181℃。【功能與主治】:牛皮癬等慢性皮膚玻【別名】:蒽林,蒽三酚,去甲基苛椏素,二羥蒽酚,Anthralinum,Ciguolin。【制劑/規(guī)格】:①膏劑:0.1~1g。②復方軟膏:含本品1%。③復方霜劑:含本品0.1%,尿素0.1%。【類別】:抗銀屑病藥。*的用法用量1、濃度遞增療法:開始治療時,使用低濃度至少
多克隆抗體技術之免疫動物2012/01/09
供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類,常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定,也與抗原的性質(zhì)有關。如要獲得大量的抗體,多采用大動物;如要是獲得直接標記診斷的抗體,則直接采用本動物;如要獲得間接的標記診斷用抗體,則必須用異源動物制備抗體;如果難以獲得的抗原,且抗體的需要量少,則可以采用純系小鼠制備;一般實驗室采用的抗體,多用兔和羊制備。免疫用的動物選擇適齡的健康雄性動物,雌性動物特別是妊娠動物用于制備免疫抗體則非常不合適,有時甚至不產(chǎn)生抗體。由于對免疫應答
細胞核移植技術2012/01/06
細胞核移植技術,是指將一個動物細胞的細胞核移植至去核的卵母細胞中,產(chǎn)生與供細胞核動物的遺傳成份一樣的動物的技術。科學家們已經(jīng)先后在綿羊、小鼠、牛、豬、山羊等動物上獲得胚胎細胞核移植后代,目前,體細胞克隆也在牛、山羊、小鼠等物種上均獲得了成功。細胞核移植方法先在體外培養(yǎng)的體細胞中進行基因?qū)耄Y選獲得帶轉(zhuǎn)基因的細胞。然后,將帶轉(zhuǎn)基因體細胞核移植到去掉細胞核的卵細胞中,生產(chǎn)重構(gòu)胚胎。重構(gòu)胚胎經(jīng)移植到母體中,產(chǎn)生的仔畜是轉(zhuǎn)基因動物。細胞核和克隆的分類按使用的細胞性質(zhì)不同克隆可分為:①胚性克隆用未分化的
蘇木素伊紅染色液的技術要點2012/01/04
蘇木素伊紅染色液套裝組合:Harris*50ml,水溶性伊紅染色液50ml,蘇木素染色分化液50ml,蘇木素染色返蘭液50ml蘇木素伊紅染色是組織病理學經(jīng)典的常規(guī)染色方法,歷經(jīng)上百年的應用歷史至今仍*。因此,蘇木素伊紅染色是病理切片制作中極為重要的技術環(huán)節(jié)。染色方法:1.切片脫蠟二甲苯I5分鐘,2.切片脫蠟二甲苯II5分鐘,3.100%1、100%2、95%1、95%2、70%梯度乙醇各30,秒鐘,4.自來水流水沖洗1分鐘,5.蘇木素染色5—8分鐘(依染液新舊調(diào)整染色時間),6.自來水流水沖洗1
植物病毒病檢測方法2011/12/30
植物病毒病檢測方法植物病毒病是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上一種重要病害,嚴重影響農(nóng)作物的產(chǎn)量和質(zhì)量,目前還沒有1種治療效果較理想的藥劑,對發(fā)病植株做到早期診斷及提前檢測就顯得尤為重要。植物病毒學歷經(jīng)近百年的發(fā)展,植物病毒的檢測方法與手段也在不斷發(fā)展與改進。常用的方法有侵染力測定法、血清學方法、電子顯微鏡計數(shù)和分子生物學法等。1.4.1侵染力測定法侵染力測定法是將病毒樣本接種在植物上,根據(jù)侵染力的大小定量。它的靈敏度在所有定量法中是比較高的,而且是其他定量法的基礎。設計一種新的定量法,如果不經(jīng)過侵染力的驗證,將無法
雙抗體夾心法測抗原2011/12/29
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:1)將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。2)加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。3)加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。4)加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色,測知標本中抗原的量。在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例
如何正確 的進行ELISA測定操作2011/12/26
如何正確的進行ELISA測定操作臨床ELISA測定現(xiàn)通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式,測定操作非常簡單,一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面,其中任一步驟的不當都會影響測定結(jié)果,且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚。現(xiàn)分述如下。一、臨床標本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和
使用無菌室的規(guī)則2011/12/23
1、進入無菌室人員請遵守下列規(guī)定:欲使用無菌室之研究人員,請于每學期初先至醫(yī)學生物科技研究所辦理。請?zhí)钔咨暾埍砀癫⒑灻w章以示認同并愿意遵守使用規(guī)范,經(jīng)核準后領用無菌室大門鑰匙及卡片,新進人員請到任后依相同規(guī)定辦理。申請長期使用者,將排入無菌室值日生之輪值工作。臨時使用者,請到醫(yī)學生物科技研究所辦理無菌室臨時使用申請,經(jīng)塡妥申請表格并簽名蓋章以示認同并愿意遵守使用規(guī)范后,核準使用無菌室,有效期限為14天。每次使用前請先至醫(yī)學生物科技研究所辦理登記預約,再領用無菌室大門鑰匙及卡片,并請當天歸還鑰匙
酶免疫技術的特點2011/12/21
酶免疫技術是利用酶催化底物反應的生物放大作用,提高特異性抗原-抗體免疫學反應檢測敏感性的一種標記免疫技術。該技術所用的酶要求純度高、催化反應的轉(zhuǎn)化率高、專一性強、性質(zhì)穩(wěn)定、來源豐富、價格不貴、制備成的酶標抗體或抗原性質(zhì)穩(wěn)定,繼續(xù)保留著它的活性部分和催化能力。在受檢標本中不存在與標記酶相同的酶。另外它的相應底物應易于制備和保存,價格低廉,有色產(chǎn)物易于測定,光吸收高。一、酶和酶作用的底物1.辣根過氧化酶(HRP):HRP在蔬菜作物辣根中含量很高,純化方法也不復雜。它是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子
細胞蛋白質(zhì)內(nèi)電子移動圖像獲取2011/12/19
美國明尼蘇達大學研究人員zui近拍攝到電子在細胞蛋白質(zhì)中移動的分子圖像。研究人員稱,這是生物學界一項突破性研究成果,將來有望應用于提高納米電路和電力運輸系統(tǒng)等的能效。這項研究由明尼蘇達大學生物科學學院副教授卡里·威爾莫特領導完成,研究成果刊登在新一期《科學》雜志上。該突破性成果有望應用于提高納米電路和電力運輸系統(tǒng)等的能效。電子在細胞內(nèi)移動產(chǎn)生的能量是生物體生存的基本能量來源之一,由此產(chǎn)生的能量被人體用來生成蛋白質(zhì)、脫氧核糖核酸等復雜分子。這些復雜分子是促進生物體生長、維持生命和儲存能量的基石。威
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