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Dylight 488抗體大全2013/09/25

顧名思義，熒光二抗通常指代的就是帶熒光團標記的二抗，這樣的二抗可以通過觀察其在不同波長下熒光的強度來確定其二抗的含量。常見的熒光團包括FITC、Rhodamine、TexasRed、PE、Cy系列等。比如FITC即異硫氰酸熒光素，是目前應用廣泛的熒光素。大吸收光波長為490～495nm，大發射光波長為520～530nm，呈現明亮的黃綠色熒光。其優勢是分子量較小為389.4，每一個抗體可標記幾個FITC分子，而且人眼對黃綠色較為敏感，因此具有很好的對比度其缺點是淬滅快。羅丹明（Rhodamin）及

Myc抗體分類有哪些？2013/09/22

隨著蛋白質組學的迅猛發展，重組蛋白質的使用在近年來大大增加。重組雜合體含有一個親和標簽如GST、Myc、His等，可用于輔助目標蛋白的純化，這已經被廣泛使用。利用融合蛋白有助于重組蛋白純化和檢測的這個有點被廣泛認可。Myc標簽相當于人的c-Myc410-419位肽段（序列為：EQKLISEEDL）。Myc標簽可放在C端或N端，但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質的活力，因此Myc標簽系統廣泛應用于檢測但很少用于純化。Myc標簽已成功應用于WB雜交技術、免疫沉淀IP和流式細胞術中。因此

HA抗體目錄2013/09/22

HA標簽系統利用一個HA（流感病毒血凝素，influenzahemagglutininepitope:YPYDVPDYA）短肽肽融合到目標蛋白。HA標簽可位于蛋白質的C端或N端，該系統已廣泛應用于多種細胞類型，相應的HA標簽抗體也被廣泛應用。HA標簽抗體能特異識別C末端或N末端帶有HA標簽（HA-tagged）的融合蛋白，也可以用于檢測和HAtag融合表達蛋白的表達、細胞內定位，以及純化、定性或定量檢測HAtag融合表達蛋白等。HA（流感病毒血凝素表位，YPYDVPDYA）短肽結構選擇合適HA標

β-Tubulin使用手冊2013/09/22

Tubulin即微管蛋白，是細胞的一種骨架蛋白。Tubulin分為α、β、γ、δ、ε等多種tubulin，其中α-Tubulin和β-Tubulin可以形成異源二聚體，是形成微管的主要的兩種Tubulin。α-tubulin和β-tubulin分子量分別為55kDa和50kDa，其實際檢測條帶均在55kDa左右。作為內參，β-tubulin的蛋白水平通常不會發生改變，因此被廣泛用于WesternBlotting時上樣量是否一致的參照，也常被用于免疫染色觀察細胞的微管結構。如何選擇合適的β-Tub

β-actin抗體目錄推薦2013/09/22

Actin即肌動蛋白，是細胞的一種重要骨架蛋白。Actin大致可分為六種，其中四種是不同肌肉組織特異性的，其余兩種廣泛分布于各種組織中，包括β-actin和γ-non-muscleactin。β-actin作為內參是得到了*的，這是針對大多數組織和細胞來說的，它廣泛分布于細胞漿內，表達量非常豐富，其含量占所有細胞總蛋白的50%。但是在一些少量特殊的情況下，如脂肪組織或細胞內，β-Actin的表達量就很少。β-actin由375個氨基酸組成，分子量大小為42-43kDa左右。如何選擇合適的β-Ac

GAPDH antiboy 操作指南2013/09/22

在WesternBloting實驗中，可能存在總蛋白濃度測定不準確，或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參，比如內參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達，廣泛用作Westernblot蛋白質標準化的內參。如何選擇合適的GAPDH抗體？內參抗體雖然選擇較多，但是也

His標簽抗體錯誤問題集錦2013/09/22

His標簽是由6個*（His-His-His-His-His-His）組成的短肽,專門設計用于重組蛋白質的吸附純化。由于分子量較小，并且較容易分離和純化，His-tag融合標簽與其他標簽相比有很多明顯優勢,是目前用于純化的融合標簽中使用的一種。His抗體可以用于檢測和His標簽融合表達蛋白的表達、細胞內定位，以及純化、定性或定量檢測His融合表達蛋白等。然而，目前商品化His-tag的單克隆抗體（mAb）種類不多,且價格也十分昂貴。如何選擇合適的His標簽抗體？我們在選擇His抗體時，主要根據自

GFP進口抗體有哪些？2013/09/22

GFP（GreenFluorescentProtein，綠色螢光蛋白）是由下村脩等人在1962年在一種學名Aequoreavictoria的水母中發現。其基因所產生的蛋白質，在藍色波長范圍的光線激發下，會發出綠色螢光。GFP標簽可位于蛋白質的C端或N端，該系統已廣泛應用于各種細胞類型，包括細菌、酵母和哺乳動物細胞等，相應的GFP標簽抗體也被廣泛應用。一般來說，GFP抗體不僅可以檢測GFP或其適當的突變體，也可以檢測和GFP或其適當的突變體融合表達蛋白的表達、細胞內定位，以及純化、定性或定量檢測G

GST抗體問題集錦2013/09/22

GST標簽系統具有蛋白表達產率高、表達產物純化方便，以及利于GST抗體制備等特點和優勢。GST融合蛋白在水溶液中可溶，可從細菌裂解液中提取，在不變性的條件下通過親和層析得到，也可以直接被位點特異性蛋白酶裂解去除。正是由于以上的優點，商品化的GST融合蛋白表達體系以及GST標簽抗體系統至今仍被廣泛應用。用GST融合表達系統表達外源基因時，需要對融合表達的產物進行檢測和純化，這里面就包括了GST標簽抗體的應用，如果選擇一個的GST抗體顯得尤為重要。如何選擇合適的GST抗體？我們在選擇GST標簽抗體時

Flag抗體試驗問題集錦2013/09/22

Flag標簽系統是已被*的用于表達、純化以及檢測融合蛋白的表達系統，廣泛應用于Westernblotting、免疫細胞組化、免疫共沉淀、流式細胞術、蛋白純化以及蛋白相互作用、蛋白分離等多個研究領域。Flag標簽是一個與重組蛋白相融合的由8個親水氨基酸（DYKDDDDK）組成的多肽片斷。Flag標簽只有8個氨基酸組成，因此它不會占據其他表位與結合域，避免導致融合蛋白的功能、分泌性以及轉運發生改變。由于它的親水性特點，Flag標簽傾向于定位在融合蛋白表面，因此更易與抗體結合以及被腸激酶酶解。如何選擇

mCherry抗體如何使用？2013/09/22

mCherry是一種被廣泛用于生物技術作為示蹤劑的紅色熒光染料，包括分子的標記和細胞組分的定位等。不同于其它從維多利亞水母中分離的GFP蛋白和其它綠色熒光蛋白變體，mCherry以及其它大多數紅色熒光蛋白是從Discosoma菌種中分離出來的蛋白。mCherry因為其顏色和單體分子的光穩定性，比其它熒光蛋白標簽更優異，其大激發光和發射光分別為587nm和610nm。如何選擇合適的mCherry標簽抗體？我們在選擇mCherry抗體時，主要根據自己的需要，特別是實驗應用上的需要。其中需要考慮的因素

線粒體內參抗體精品推薦2013/09/22

*氧化酶（Cytochromecoxidase，簡稱COX）是一種異源寡聚酶，通常含有13個亞基，定位于線粒體內膜，是線粒體呼吸鏈的酶復合物。*氧化酶中形成催化中心的3個大的亞基由線粒體DNA編碼，其余10個亞基包括COXIV由細胞核內的基因組DNA編碼。*氧化酶（COX）活性缺陷和人類多種疾病相關。COXIV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的內參抗體，其檢測目標蛋白大小為16kD左右。什么時候選擇線粒體內參抗體？我們知道，在WesternBlotting中使用內參其實就是在WB過程中的另外用內參對應

核內參PCNA列表2013/09/22

增殖細胞核抗原（ProliferatingCellNuclearAntigen簡稱PCNA）由Miyachi等于1978年在SLE（系統性紅斑狼瘡）患者的血清中發現并命名，因其只存在于正常增殖細胞及腫瘤細胞內而得名。PCNA是一種分子量為36KD的蛋白質，在細胞核內合成，并存在于細胞核內，為DNA聚合酶的輔助蛋白。由于其在細胞核內穩定表達，因此其抗體被廣泛應用于細胞核蛋白的內參抗體。如何選擇合適的細胞核內參抗體？常用的細胞總蛋白質內參有GAPDH和細胞骨架蛋白β-Actin或β-Tubulin等

內參抗體大全2013/09/22

要檢測一個基因的表達產物是否正確，或者比較表達產物量的相對變化，方法是WesternBlot。雖然，順利的時候WesternBlot做起來很簡單，可不順的時候也很令人心煩――做不出結果啦、假陽性啦、結果出現多條帶啦、到底是一抗有問題還是二抗有問題啦……畢竟，作為一種有活性的生物大分子，抗體和抗原的反應畢竟不象1+1那么明確，而用這種不確定的試劑來測定同樣知之甚少的表達產物，確實是有一定的不確定性的。所以，嚴謹的WesternBlot實驗設計中要求有良好的參照體系，對實驗結果分析是非常有用的。我們

Abbkine DyLight熒光二抗——高性價比的全新熒光體驗2013/09/11

美國Abbkine的DyLight™系列熒光標記是一種近年來被廣泛應用的新型熒光染料，由于具有很好的光譜寬度、更強的熒光強度，更高的光學耐受性（抗淬滅性）、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優勢，越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight™種類齊全，如Dylight405是藍色熒光，替代Alexa405；DyLight549是綠色熒光，可*替代FITC/Cy2/Alexa488；*替代Cy3/Rhodamin/Alexa546/Alexa555的Dylight549；替代TexasRed/Ale