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1,4,5-三磷酸肌醇檢測試劑盒樣本處理及要求2021/08/04
1,4,5-三磷酸肌醇檢測試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參
昆蟲卵巢細胞;SF9培養(yǎng)的優(yōu)點2021/08/03
昆蟲卵巢細胞;SF9培養(yǎng)的優(yōu)點:1.研究的對象是活細胞在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。3.研究的樣本可以達到比較均一性通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,
淀粉分支酶(SBE)?樣品制備2021/07/29
淀粉分支酶(SBE)樣品制備:1).直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。2).過濾混濁溶液。3).除去樣品中的CO2(果糖含量測試盒說明書過過濾)。4).果糖含量測試盒說明書過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。5).調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。6).用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。7).用PVPP(聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。8).壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。9)
小鼠β防御素elisa檢測試劑盒?操作步驟2021/07/28
小鼠β防御素elisa檢測試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第
大鼠纖維母細胞;1/EJ 1-1操作步驟2021/07/22
大鼠纖維母細胞;1/EJ1-1操作步驟:1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置
天冬酰胺合成酶(AS)操作步驟2021/07/21
天冬酰胺合成酶(AS)操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔
單寧含量測試盒?的存放以及注意事項2021/07/20
單寧含量測試盒的存放以及注意事項:ELISA試劑盒收到后立即儲存于2-8℃下:效期見試劑盒標簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運用前:一切試劑平衡至室溫:不同批次的試劑不能交流運用。1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:儲存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體:1瓶:0.6ml:濃縮:HRP符號的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑運用前需用示蹤劑抗體稀釋液進行稀釋;儲存于2-8℃至有效期。3.包被板:96孔:包被了抗人胎球蛋白A抗體;微孔板固定于板架上:密封于含有
驢血清制備方法2021/07/15
驢血清制備方法:此法用于制備間接法抗抗體。因抗原為可溶性,故多需加佐劑。(1)淋巴結(jié)注射法1)選擇體重2~3Kg的健康雄性家兔(2只以上),編號;2)在家兔兩后腳掌共注射活卡介苗,50mg(約0.6mL.每只足庶部皮下0.1mL,皮內(nèi)0.2mL)。7~10d后,鼠或國窩處淋巴結(jié)腫大如黃豆或蠶豆大小;3)用二指固定腫大之淋巴結(jié),兩側(cè)淋巴結(jié)各注射加有*佐劑的抗原o.5mL,共1mL。事先將抗原稀釋為5~10mg/ml,在免疫前一日加入青、鏈霉素,使青、鏈霉素的濃度分別為1000U/mL和1000mg
植物總酚(Tp)測試盒的存放以及注意事項2021/07/14
植物總酚(Tp)測試盒的存放以及注意事項:ELISA試劑盒收到后立即儲存于2-8℃下:效期見試劑盒標簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運用前:一切試劑平衡至室溫:不同批次的試劑不能交流運用。1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:儲存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體:1瓶:0.6ml:濃縮:HRP符號的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑運用前需用示蹤劑抗體稀釋液進行稀釋;儲存于2-8℃至有效期。3.包被板:96孔:包被了抗人胎球蛋白A抗體;微孔板固定于板架上:密
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1操作步驟2021/07/13
大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-1操作步驟:1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮
人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒樣本處理及要求2021/07/08
人血清總補體(CH50)ELISA試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)操作步驟2021/07/07
6-磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在第一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、
標準豬血清(無菌 未經(jīng)滅活)保存的注意事項2021/07/06
標準豬血清(無菌未經(jīng)滅活)保存的注意事項以下幾點:(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入3
根蛋白免疫組化試劑盒樣本處理及要求2021/07/01
根蛋白免疫組化試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.
偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒操作步驟2021/06/30
偽狂犬病毒gE2.0抗體診斷試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔
雞1,3-βD葡葡糖苷酶elisa試劑盒標本收集2021/06/29
雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)elisa試劑盒標本收集:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2)血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(200
細胞角蛋白4免疫組化試劑盒反應(yīng)步驟2021/06/24
細胞角蛋白4免疫組化試劑盒反應(yīng)步驟:(1)嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。(2)加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn)。(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELI
小鼠抗人kappa雜交瘤細胞;細胞株培養(yǎng)的無菌技術(shù)要點2021/06/23
小鼠抗人kappa雜交瘤細胞;mAbhIgκ-490細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點:1.實驗開始前,無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘*滅菌,用70%ethanol擦拭無菌操作臺面,并且打開無菌操作臺風扇運行10分鐘之后,才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株,即使培養(yǎng)基*相同也不可共用培養(yǎng)基,以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后,請將實驗物品拿出工作臺,用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后,才能進行下一個細胞株的操作。
著絲粒蛋白抗體ZW10的生物素化標記實驗要點2021/06/22
著絲粒蛋白抗體ZW10的生物素化標記實驗要點:1.如在反應(yīng)混合液中有疊氮鈉或游離氨基存在,會抑制標記反應(yīng)。因此,蛋白質(zhì)在反應(yīng)前要對0.1mol/L碳酸氫鈉緩沖液或0.5mol/L硼酸緩沖液充分透析;2.所用的NHSB及待生物素化蛋白質(zhì)之間的分子比按蛋白質(zhì)表面的ε-氨基的密度會有所不同,選擇不當則影響標記的效率,應(yīng)先用幾個不同的分子比來篩選最適條件;3.用NHSB量過量也是不利的,抗原的結(jié)合位點可能因此被封閉,導致抗體失活;4.由于抗體的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此時可加入去污劑如Trit
人直腸組織提取物實驗事項2021/06/17
人直腸組織提取物實驗事項:1.試劑準備:所有試劑都必須在使用前達到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣或加試劑時,請注意在吸取標本/標準品,酶結(jié)合物或底物時,前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導致不同的“預(yù)孵育"時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用多道移液器加樣。3.孵育:為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標
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