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類白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒的具體注意事項2019/07/10
類白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響后檢
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒樣本處理及要求2019/06/26
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。3.細胞培養物上清或其它生物標本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。注:標本溶血會影響后檢測結果
人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒原理及操作步驟2019/06/19
人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人5核苷酸酶(5-NT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人5核苷酸酶(5-NT)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。操作步驟1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋
人玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒問題解析2019/06/12
人玻連蛋白(VTN)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使用了過期的顯色
金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒問題解析2019/06/05
金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒問題解析:1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理3.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動4.顯色問題:使用了過期的顯色劑
科研試劑實驗運用血清產品,不毀試驗幾項操作2019/05/29
近來,酶聯免疫學第三方檢測中心技術專員在整理問題時發現,許多客戶在運用產品方面還需要多加改善。來看看下面的內容,這樣運用血清產品,不毀試驗就不錯了!您是這樣操作的嗎?操作:1.凍結血清不隨時搖晃均勻,使溫度及成分均一。2.在沒有特別的要求下,還堅持要做熱滅活。3.直接由-20℃直接至37℃凍結,溫度改變太大。4.將血清置于37℃太久,血清變得渾濁,許多較不穩定的成份因而受到破壞。注:在運用血清產品時,一定要從各個視點去考慮,不能粗心。我公司技術專員建議您:血清應保存在-5℃至-20℃,若一次無法
進口ELISA檢測試劑盒出現假陽性的現象一般是與錯誤的操作有關2019/05/22
進口ELISA檢測試劑盒出現假陽性的現象一般是與錯誤的操作有關,本文與大家聊一聊如何避免假陽性現象。1、加樣對于間接進口ELISA檢測試劑盒標本一般都要進行稀釋,如果加樣不準就會造成誤差,尤其當稀釋倍數大時,很小的誤差,會導致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標本呈陽性(或陰性)。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統處理標本,可較好地避免以上誤差。2、洗滌在進口ELISA檢測試劑盒中正確的洗滌是保證得
我司為客戶分析Elisa試劑盒操作問題2019/05/15
我司為客戶分析Elisa試劑盒操作問題:一、細胞上清液樣本如何處理?答:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。二、為什么有的試劑盒是采用競爭Elisa法?答:小分子抗原或半抗原因為缺乏可作夾心法的兩個以上的位點,因此不能用雙抗體夾心
ELISA技術測定單克隆抗體操作步驟詳解2019/05/08
ELISA試劑盒技術測定單克隆抗體操作步驟①抗原包被:兔抗人IgG作為抗原,用包被液l:8000稀釋,100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過一夜。②洗滌:次日傾去凹孔內的液體,洗滌液洗3次。③封閉:加l00μL/孔封閉液,室溫放置0.5h。④洗滌:用洗滌液洗3次。⑤加待測樣品(一抗):將含單克降抗體的細胞培養上清在另—塊板上用PBS連續稀釋(按照1:2或1:10),100μL/孔加到已包被的板上,每個樣品平行做兩份,PBS或空白培養基作為陰性對照,已知樣品作為陽性對照。加蓋37℃恒
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯免疫分析試劑盒幾點注意事項2019/04/29
人血清淀粉樣蛋白A(SAA)酶聯免疫分析試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(
快接招:ELISA試劑盒化學試劑的四大稱謂,2019/04/24
ELISA試劑盒*揭秘:化學試劑的四大稱謂,快接招:以來歷為根底的稱謂進口試劑、天然物獲取、浸膏、干粉、獲取物……以習慣為根底的稱謂:化學藥品、精密化學品、藥品、冷偏試劑、特種試劑、一類試劑、二類試劑、三類試劑、小種類試劑……以含量為根底的稱謂規范物質、規范溶液、規范雜質溶液、規范對照品、規范樣品、行標試劑、指示試劑、基準物質、基準試劑、化學基準、化學規范、儀器規范、剖析試劑、一類試劑、二類試劑、超純試劑、高純試劑、當量試劑、醫藥規范、光譜純、色譜純、電子純、鋼鐵標樣、生鐵標樣、煤標樣、礦石標樣
人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/17
人輪狀病毒IgA(RV-IgA)ELISA試劑盒操作步驟1.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用5.洗滌:小心揭掉封板膜,
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/12
人白色念珠菌(C.albicans)ELISA試劑盒操作步驟:1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在
ELISA酶免疫技術類型2019/04/04
酶免疫技術類型酶免疫技術按照抗原抗體系統是定位于組織細胞上還是存在于液體樣品中分為酶免疫組化技術和酶免疫測定(EIA),酶免疫測定又可分為均相酶免疫測定和異相酶免疫測定。(一)均相酶免疫測定均相酶免疫測定是利用酶標記物結合成抗原抗體復合物后,標記酶的活性就受到抑制,因而反應后不需分離結合的和游離的酶標記物,直接測定系統中的總標記酶的活性的變化,即可確定結合的酶標記物的數量,從而得到待測物的含量的一種技術。常用于半抗原或小分子抗原如藥物、激素等的測定。常用的技術類型有:1.酶免疫增強測定技術(EM
ELISA的主要常用類型及步驟2019/03/27
ELISA試劑盒的主要常用類型及步驟1.間接法測抗體間接法是檢測抗體常用的方法。其原理為利用酶標記的抗抗體(二抗)以檢測與固相抗原結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:1)將特異性抗原與固相載體聯結,形成固相抗原,洗滌除去未結合的抗原及雜質。2)加稀釋的樣本,保溫反應。樣本中的特異抗體與固相抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,樣本中的其他成份在洗滌過程中被洗去。3)加酶標抗抗體。固相免疫復合物中的抗體與酶標抗抗體結合,從而間接地標記上酶。洗滌后,固相載體
每種試劑都有其反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素2019/03/21
每種試劑都有其反應模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,ELISA試劑盒反應板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發,板上應加蓋。作為記錄測定結果的儀器,酶標儀的性能穩定與否,決定結果的可靠度。首先酶標儀應定期進行保養,對濾光片要定期校正;其次酶標儀波長設置要正確,使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,ELISA試劑盒在用酶標儀讀數時先擦試微
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測試劑盒檢測前幾點準備工作2019/03/13
大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)檢測試劑盒檢測前準備工作:1.請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。2.將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現象,可用40℃水浴微加熱使結晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時洗滌液應為室溫)。當日使用。3.標準品:于10000×g離心1分鐘,加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中,旋緊管蓋,靜置10分鐘,上下顛倒數次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為
特推出ELISA試劑盒HRP的制備方法分享2019/03/07
ELISA試劑盒HRP的制備方法1).水提取:稱取5kg用水沖刷干凈的鮮辣根(辣根皮中亦含有豐富的HRP),用菜刀切成小碎塊,在絞肉機中絞碎1~2次。碎渣漿用1倍體積的水低溫下攪拌提取過一夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干機(或離心機)甩干,收集濾液,碎渣再用1/4倍體積水浸泡提取1次,合并2次濾液,測得總體積。2).硫酸銨分級分離:在不斷攪拌下,每1000mL濾液中慢慢加入226g硫酸銨粉末(相當于0.40飽和度,0℃),大約在1~2h內加完,置冷室中放置過一夜。次日將上清液小心地用虹吸管
在elisa試劑盒實驗中,只有遵循它應有的規則才能更好的完成實驗2019/02/26
試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白介素elisa試劑盒水平。用純化的人白介素elisa試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標記的白介素抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人白介素含量。根據前面說到的elisa質量控制中我們知道,由ELISA的性質
分享ELISA檢測試劑盒新手入門的使用技術2019/02/15
公司技術專員為ELISA檢測試劑盒新手入門的使用技術報告做出一番整理,在這里分享給您供參考。ELISA方法原理1.雙抗體(原)夾心法:檢測抗原(體)的常見方法,應用針對抗原兩個不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標抗體檢測溶液中的抗原(適用于二價以上抗原,不能測小分子半抗原)。2.間接法:檢測抗體的方法,利用酶標記的抗抗體(第二抗體)檢測已與固相抗原結合的抗體。3.競爭法:檢測抗原或小分子半抗原、抗體,以測抗原為例,使待測抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合,結果如待測抗原含量越多,與固相抗體結
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