【儀表網(wǎng) 研發(fā)快訊】近期，中國科學院上海光學精密機械研究所融創(chuàng)中心付國副研究員團隊，在基于單分子定位的光學超分辨顯微術(shù)領(lǐng)域取得研究進展。相關(guān)成果以“Molecular Resolution Imaging Based on Two-color Single-Molecular Localization Microscopy (SMLM)”為題發(fā)表于Optics Express。
 

　　2006年Eric Betzig提出基于單分子定位的超分辨顯微術(shù)，打破了光學衍射極限，實現(xiàn)了幾納米到幾十納米的分辨率，從而獲得了2014年的諾貝爾化學獎。近年來，國內(nèi)外研究團隊已經(jīng)將光學超分辨顯微術(shù)的分辨率提升到了分子尺度(2-4nm)，甚至逼近了1 nm的空間分辨率。然而，這些技術(shù)往往需要極其復(fù)雜和成本高昂的光學系統(tǒng)，或者需要定制化的樣品準備，因而極大地限制了這些顯微術(shù)的廣泛使用。為此，研究團隊開發(fā)了一種應(yīng)用難度更低的分子尺度分辨率的光學超分辨顯微術(shù)，命名為MITI (Molecular Imaging by Two-color Imaging )。
 

　　MITI結(jié)合了單分子定位顯微術(shù)和雙色成像技術(shù)，通過雙色成像，將不同熒光標記的熒光分子進行分離，對獲得的熒光分子的定位分布進行擬合，獲得該熒光分子的中心和定位精度，擬合得到的定位精度等于單分子定位顯微術(shù)的定位精度(幾納米到幾十納米)除于熒光分子的定位總數(shù)，理論上最高分辨率可以到亞納米。MITI能夠有效分辨標記在2-10 nm長的單鏈DNA兩端的熒光分子以及融合在5 nmFtsZ蛋白兩端的光控熒光蛋白，并且MITI可以實現(xiàn)精準的2-10 nm的距離測量。MITI為分子尺度的生物學過程的解析提供了一個有效手段，在分子尺度生物結(jié)構(gòu)和距離的解析開辟了一條新的通道。
 

　　本工作得到了上海光機所啟動基金支持。
 

　　圖 1. MITI原理示意圖。(a-d)單分子定位顯微術(shù)(SMLM)的成像過程，分別為納米結(jié)構(gòu)標記示意圖(a)，單分子定位分布(b)，基于單分子定位分布生成的超分辨圖像(c)以及單分子定位精度的分布(d)。(e-j)MITI的成像過程，分別為納米結(jié)構(gòu)標記示意圖(e)，雙通道內(nèi)的單分子定位分布(f)，基于單分子定位分布生成的超分辨圖像(g)，單分子定位精度的分布(h)，MITI圖像(i)以及雙通道合并的MITI圖像(j)。