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PCR反應條件把控2023/3/20
PCR反應條件的把控1.PCR反應的緩沖液提供合適的酸堿度與某些離子。2.鎂離子濃度總量應比dNTPs的濃度高，常用1.5mmol/L。3.底物濃度dNTP以等摩爾濃度配制，20～200umol/L。...
設計引物應遵循原則總結2023/3/13
引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。...
elisa試劑盒實驗液體類標本收集流程2023/3/6
為了更好的進行elisa試劑盒實驗，elisa試劑盒實驗液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。接下來為大家簡單講述一下elisa試劑盒收集標本流程，希望以下介紹對大家有所幫...
PCR反應DNA 復制所需的基本要素2023/2/27
聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReaction，PCR）是一項利用DNA雙鏈復制原理，在生物體外復制特定DNA片段的的核酸合成技術。可在短時間內大量擴增目的DNA片段，而不必依賴大腸桿...
防止ELISA污染幾種方法2023/2/20
防止ELISA污染幾種方法：污染會在ELISA數據的下游分析中造成許多問題，如孔與孔之間的高差異、高背景值和弱或低信號強度。有幾種方法可以防止污染：1.在一個干凈的環境中工作；2.通過去離子或蒸餾對所...
熒光定量試劑盒基本反應步驟2023/2/14
PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：1、模板DNA的變性：模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下...
ELISA試劑盒蔗糖封閉的原理2023/2/10
ELISA的試劑盒說明上寫封閉液用蔗糖溶液，一般是用BSA或酪蛋白的蛋白分子封閉空白位點，蔗糖封閉的原理：1、ELISA實驗中，蔗糖本身沒有封閉作用;2、封閉液一般是BSA、酪蛋白等或者是Tween等...
大鼠表皮黑色素細胞培養操作2023/1/29
大鼠表皮黑色素細胞培養操作:1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然...
ELISA試劑盒洗滌要點2023/1/16
洗滌是ELISA不同于均相免疫學檢測技術的一大特征，洗滌在整個ELISA反應過程中雖不是一個反應步驟，卻非常關鍵。其目的是去除反應體系中與反應無關的成分，包括未結合的酶結合物以及反應過程中非特異性吸附...
細胞系研究應用領域2023/1/9
細胞系指原代細胞培養物經首ci傳代成功后所繁殖的細胞群體，也指可長期連續傳代的培養細胞。現在細胞系廣泛的應用于科學研究和藥物生產，用途包括：1、科學研究：藥物研究開發與基礎研究藥物研究與開發：（1）新...
ELISA避免污染方法2023/1/5
ELISA避免污染方法：污染會在ELISA數據的下游分析中造成許多問題，如孔與孔之間的高差異、高背景值和弱或低信號強度。有幾種方法可以防止污染：1.在一個干凈的環境中工作；2.通過去離子或蒸餾對所有的...
小鼠elisa檢測試劑盒操作步驟2022/12/19
小鼠elisa檢測試劑盒操作步驟：1.取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。2.分組：取出96孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準品組（...
小鼠血清/血漿樣本的制備2022/12/12
血清和血漿均是不含細胞（包括血小板）等有形成分的血液液體部分，其主要區別是血清不含凝血因zi和血小板，血漿則含有凝血因zi，它們的制備方法如下：1、血清的制備：獲得的血液不能抗凝，盛于離心管或可以離心...
特異性RNA酶抑制劑的廣泛應用2022/11/23
下面介紹３種廣泛應用的特異性RNA酶抑制劑。1、RNA酶的蛋白質抑制劑是從人胎盤分離的一種蛋白質可與多種RNA酶緊密結合（KI≈3x1010）形成非共價結合的等摩爾復合物，使RNA酶失活。此蛋白質體內...
PCR反應循環參數分析2022/11/14
PCR反應循環次數，一般為25～30次。循環數決定PCR擴增的產量。模板初始濃度低，可增加循環數以便達到有效的擴增量。但循環數并不是可以無限增加的。一般循環數為30個左右，循環數超過30個以后，DNA...
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