ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Desulfovibriodesulfuricanssubsp.desulfuricans 脫硫弧菌脫硫亞種（脫硫微螺菌、脫硫螺菌、脫硫桿菌、脫硫芽孢弧菌、脫硫弧菌）Desulfovibriodesulfuricanssubsp.desulfuricans安全等級(jí):1模式菌株:no厭氧，139或140生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：96%

Peptostreptococcus anaerobius 厭氧消化鏈球菌Peptostreptococcus anaerobius凍干安全等級(jí):1模式菌株:。培養(yǎng)基:測(cè)試，質(zhì)量控制。哥倫比亞血平板生長(zhǎng)條件:37℃，厭氧，2-3天 純度：99%

Bacillusnaganoensis（Pullulanibacillusnaganoensis） 長(zhǎng)野解普魯蘭桿菌Bacillusnaganoensis（Pullulanibacillusnaganoensis）分離基物:土壤，日本長(zhǎng)野縣安全等級(jí):1模式菌株:。產(chǎn)耐高溫耐性普魯蘭酶138生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：98%

Pseudomonastoyotomiensis PseudomonastoyotomiensisPseudomonastoyotomiensis分離基物:浸泡在含烴溫泉的土壤，日本北海道安全等級(jí):1模式菌株:33生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：98%

Streptococcusmutans 變異鏈球菌Streptococcusmutans分離基物:兒童齲齒安全等級(jí):1模式菌株:no對(duì)紅霉素、利福平、利福霉素AMP、壯觀霉素、鏈霉素敏感。血清型C。116或114,5%CO2or厭氧生長(zhǎng)條件:37℃ 純度：98%

Ochrobactrum anthropi 人蒼白桿菌Ochrobactrum anthropi凍干安全等級(jí):1模式菌株:營(yíng)養(yǎng)肉汁瓊脂：蛋白胨 10.0 g，牛肉提取物 3.0 g，NaCl 5.0 g，瓊脂 15.0 g，蒸餾 1.0 L，pH 7.0生長(zhǎng)條件:30℃，好氧 純度：98%

Bacillusvireti BacillusviretiBacillusvireti安全等級(jí):1模式菌株:no2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：98%

Bacillusdrennsis BacillusdrennsisBacillusdrennsis安全等級(jí):1模式菌株:no2生長(zhǎng)條件:30℃ 純度：≥97%
NF人神經(jīng)絲蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理50301人心肝成纖維微RNA4-三基異酯IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2)  胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2（多肽）

50320人心臟成纖維-心室微RNA4-三基異酯IGFBP-3 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 3)C-term  胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-3抗原

50330人心肌成纖維-心房微RNA4-三基異酯IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3)  胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗原

82011人角膜上皮微RNA化銠IKB Beta (Inhibitor of KB)  KB抑制蛋白β(多肽)

慶大霉素（10mg/ml）

Gentamicin人角膜微RNA化銠IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha)  KB抑制蛋白α抗原

慶大霉素（50mg/ml）

Gentamicin人視網(wǎng)膜色素上皮微RNA三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二)釹(III)IL-12(Interleukin-12)  白介素12抗原（白介素-12）

青霉素-鏈霉素

Penicillin -Steptomycin人晶狀體上皮微RNA三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二)釹(III)IL-12(Interleukin-12)human peptide  白介素12抗原(人)

青霉素-鏈霉素

Penicillin -Steptomycin人虹膜色素上皮微RNA9,9-雙(4-氨基苯基)芴IL-12R Beta2/IL12RB2 peptide  白介素-12受體β2抗原
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)