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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第8年

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DAPI溶液(即用型)

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-09 13:18:48瀏覽次數(shù):167次

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貨號(hào) FS-X9668
DAPI溶液(即用型)正在熱銷的產(chǎn)品:糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯250g適用于微生物檢驗(yàn)中各種糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),無(wú)jun加入各種糖chun類物質(zhì)(SN標(biāo)準(zhǔn))
改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基 Sabouraud's Agar,Modified 用于真jun檢測(cè)
酪胨瓊脂 Peptone From Casein Agar 250克 生物制品無(wú)jun試驗(yàn)
赫氏培養(yǎng)基250g/瓶用于鼠疫桿jun的分離基礎(chǔ)incubationmedia

中文名稱:DAPI溶液(即用型)

英文名稱:DAPI solution(ready-to-use)

產(chǎn)品規(guī)格:10ml|50mL

貨號(hào):FS-X9668

產(chǎn)品介紹:

本產(chǎn)品為DAPI水溶液,為即用型工作液,可以直接用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

號(hào):28718-90-3

分子式:C16H15N5·2HCl

分子量:350.25

純度:≥90% (HPLC和 TLC)

儲(chǔ)存條件:-20℃避光,有效期一年。

DAPI(4’,6-二脒基-2-苯基吲哚)是一種能夠與DNA中大部分A,T堿基相互結(jié)合的熒光染料﹐常用于熒光顯微鏡觀測(cè)。因?yàn)镈API可以透過(guò)完整的細(xì)胞膜﹐它可以用于活細(xì)胞和固定細(xì)胞的染色。當(dāng)DAPI與雙鏈DNA結(jié)合時(shí),大吸收波長(zhǎng)為358nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。DAPI的發(fā)射光為藍(lán)色,且DAPI和綠色熒光蛋白GFP或Texas Red染劑(紅色熒光染劑)的發(fā)射波長(zhǎng)僅有少部分重疊,可以利用這項(xiàng)特性在單一的樣品上進(jìn)行多重?zé)晒馊旧?/span>

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP1)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CEMP1 ELISA Kit,CEMP1,

血紅su氧合mei1(HO1)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:HO1 ELISA Kit,HO1,

旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:RTTN ELISA Kit,RTTN,

信號(hào)su6A(SEMA6A)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:SEMA6A ELISA Kit,SEMA6A,

α半乳糖mei(αGAL)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:αGAL ELISA Kit,αGAL,

P53(P53)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:P53 ELISA Kit,P53,

TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:TARDBP/TDP43 ELISA Kit,TARDBP/TDP43,

GDP解離抑制因子2(GdI2)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:GdI2 ELISA Kit,GdI2,

CD68分子(CD68)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CD68 ELISA Kit,CD68,

B細(xì)胞活化因子(BAFF)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:BAFF ELISA Kit,BAFF,

Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:PⅠCP ELISA Kit,PⅠCP,

25羥基維生suD2(25 HVD2)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:25 HVD2 ELISA Kit,25 HVD2,

血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:PECAM1 ELISA Kit,PECAM1,

次級(jí)淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CCL21 ELISA Kit,CCL21,

γ干擾su誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIG/CXCL9)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:MIG/CXCL9 ELISA Kit,MIG/CXCL9,

谷氨suan[NMDA]受體亞基ε-2(NR-2)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:NR-2 ELISA Kit,NR-2,

復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)elisa檢測(cè)試劑盒  英文名稱:CPSA ELISA Kit,CPSA,
DAPI溶液(即用型)泰諾福韋標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:15mg  英文名稱:Tenofovir

suan土霉su標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Oxytetracycline Hydrochloride

小白菊內(nèi)酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:25mg  英文名稱:Parthenolide

suan奧斯他韋標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Oseltamivir Phosphate

lvben吩嗪標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Clofazimine

5-fu胞嘧啶標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Flucytosine

泰諾福韋酯富馬suan鹽標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Tenofovir Disoproxil Fumarate

相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:25mg  英文名稱:Clonazepam Related Compound B

fu美松叔戊suan酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Flumethasone Pivalate

度西汀相關(guān)物質(zhì)H標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:ea  英文名稱:

 


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