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ATCC細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)步驟2017/3/30

1、ATCC細(xì)胞傳代(1)試驗(yàn)準(zhǔn)備：200ul/1mlTip頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號(hào)筆，培養(yǎng)皿，離心管。(2)棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用1ml的PBS...

細(xì)胞反應(yīng)器貼壁培養(yǎng)分析2017/3/28

ATCC細(xì)胞此種培養(yǎng)方式中，細(xì)胞貼附于固定的表面生長(zhǎng)，不因?yàn)閿嚢瓒S培養(yǎng)液一起流動(dòng)，因此比較容易更換培養(yǎng)液，不需要特殊的分離細(xì)胞和培養(yǎng)液的設(shè)備，可以采用灌流培養(yǎng)獲得高細(xì)胞密度，能有效地獲得一種產(chǎn)品;...

根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞種類和主要的功能不同分類2017/3/23

(一)細(xì)胞株根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞種類不同分類1.淋巴因子(lymphokine)于命名，主要由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，包括T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL...

ATCC細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項(xiàng)2017/3/21

1.ATCC細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，無(wú)菌室及無(wú)菌操作臺(tái)(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%擦拭無(wú)菌操作抬面，并開(kāi)啟無(wú)菌操作臺(tái)風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)10分鐘后，才開(kāi)始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株...

植物細(xì)胞組織培養(yǎng)玻璃器皿介紹2017/3/16

ATCC細(xì)胞在組織培養(yǎng)中應(yīng)使用硼硅酸鹽玻璃器皿或堿性溶解度小的硬質(zhì)玻璃器皿，因鈉玻璃對(duì)組織培養(yǎng)的材料來(lái)說(shuō)通常是有毒害的，特別是在進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間重復(fù)使用時(shí)毒害會(huì)更明顯，長(zhǎng)時(shí)間地貯藏母液，也需要用玻璃瓶。培養(yǎng)...

細(xì)胞排列的模式分析2017/3/14

研究人員一直在研究控制ATCC細(xì)胞的方法，以觀察兩個(gè)細(xì)胞膜之間的直接接觸，或控制它們保持各種距離，研究細(xì)胞之間是怎樣通訊的。聲鑷的價(jià)值在于可用它來(lái)研究細(xì)胞之間的信息傳遞。它能把細(xì)胞分開(kāi)的距離，或讓細(xì)胞...

人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程分析2017/3/9

細(xì)胞株準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作對(duì)開(kāi)展人肺動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)異常重要,工作量也較大,應(yīng)給予足夠的重視,準(zhǔn)備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或無(wú)法進(jìn)行.準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑...

ATCC細(xì)胞的凍存注意事項(xiàng)和簡(jiǎn)便方法2017/3/7

ATCC細(xì)胞注意事項(xiàng)：1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)戴上手套操作。2.不...

血細(xì)胞的分離技術(shù)操作方法2017/3/2

（一）材料與試劑1．抗凝劑（1）肝素：肝素是含硫酸基的粘多糖，常用其鈉鹽或鉀鹽，它能阻止凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶，進(jìn)而抑制纖維蛋白原形成纖維蛋白，從而阻止血液凝固。常用的肝素溶液濃度為1000U/ml，市...

ATCC細(xì)胞培養(yǎng)方法分析2017/2/28

1.ATCC細(xì)胞玻璃吸管和玻璃培養(yǎng)瓶的消毒:1)高壓蒸汽滅菌15分鐘以上;2)干烤消毒140度2小時(shí)以上;2.無(wú)菌工作臺(tái)先清洗后用75%酒精擦拭干凈,紫外線照射40分鐘以上;各種培養(yǎng)板照射3小時(shí)以上;...

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中預(yù)防污染可從以下幾方面著手2017/2/23

（一）細(xì)胞系從操作者做起1、操作者責(zé)任心要強(qiáng)，要細(xì)心穩(wěn)重，操作技術(shù)要熟練。進(jìn)無(wú)菌室前要用肥皂洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘，按規(guī)定穿隔離衣。進(jìn)入后關(guān)好門(mén)，坐下來(lái)盡量少走動(dòng)。工作開(kāi)始要先用75%酒精棉球...

原代細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型2017/2/21

原代細(xì)胞體外培養(yǎng)細(xì)胞的分型（一）原代細(xì)胞貼附型：大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞貼附生長(zhǎng)，屬于貼壁依賴性細(xì)胞，大致分成以下四型：1、成纖維細(xì)胞型：胞體呈梭型或不規(guī)則三角形，中央有卵圓形核，胞質(zhì)突起，生長(zhǎng)時(shí)呈放射狀。除真...

脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析2017/2/16

脂質(zhì)體介導(dǎo)DNA轉(zhuǎn)染技術(shù)分析脂質(zhì)體介導(dǎo)是目前條件下Z方便的轉(zhuǎn)染方法之一，適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，其轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5～100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞株。用L...

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒2017/2/14

胰蛋白酶溶液的配制方法與消毒胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞系間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37...

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法2017/2/9

SHG-44細(xì)胞的轉(zhuǎn)染操作方法(1)轉(zhuǎn)染當(dāng)天，加入脂質(zhì)體/DNA混合物之前的短時(shí)間內(nèi)，更換1ml新鮮的有血清或無(wú)血清培養(yǎng)基。(2)準(zhǔn)備不同比例的DOSPER/DNA混合物，以確定每個(gè)細(xì)胞系的比例。①溶...