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小鼠ELISA檢測試劑盒挑選要求2023/01/29
小鼠ELISA檢測試劑盒挑選要求:ELISA試劑盒深受廣大科研工作者的喜歡,并且市面上的ELISA試劑盒數不勝數,這讓科研朋友們挑選的時分都比較糾結。到底怎樣挑選試劑盒呢,選什么樣的試劑盒才是性價比高呢?現將帶您了解挑選對的ELISA試劑盒6個挑選要求,希望能幫助更多的科研朋友!1、查找待測樣本的蛋白濃度:能夠通過美國國立生物技術信息中心(NCBI)的文獻,UniversalProtein(uniprot)上給出的蛋白表達量參閱值來比較elisa試劑盒中給出的樣本值與報導值是否一致;2、試劑盒的
豚鼠ELISA試劑盒安全性說明2023/01/16
豚鼠ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA)。已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物su標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。豚鼠ELISA試劑盒安全性說明:1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2、實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3、不要用嘴吸取試
小鼠ELISA試劑盒血清解凍操作技巧2023/01/09
小鼠ELISA試劑盒血清解凍操作技巧:1、請勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。2、按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。3、血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。4、隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。5、若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻,溫
ELISA實驗正確的洗板技術2023/01/05
正確的洗滌和沖洗方案尤其重要。在下游分析過程中,不充分、不一致和/或過度清洗會造成問題。有許多洗板的方法,包括使用自動洗板機、手動分流器或洗瓶。當手動吸出孔中的液體時,要注意不要碰到孔的底部--吸管的尖duan應該放在孔的一側。為了減少背景信號,清洗量需要足夠大,以去除孔中未結合的樣品和試劑。然而,過度洗滌會減少目標信號。確保所有的孔都被平均清洗,以避免在整個檢測板上引入信號變化。要做到這一點,如果是手工清洗,請檢查移液器吸頭是否固定好,如果使用自動洗板機,所有分配和吸液的噴頭必須沒有堵塞。你可
大鼠ELISA試劑盒應用范圍2022/12/19
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大
?PCR反應體系的組成與反應條件的優化2022/11/23
PCR反應體系由反應緩沖液(10×PCRBuffer)、脫氧核苷三磷酸底物(dNTPmix)、耐熱DNA聚合酶(Taq酶)、寡聚核苷酸引物(Primer1,Primer2)、靶序列(DNA模板)五部分組成。各個組份都能影響PCR結果的好壞。1.反應緩沖液:一般隨TaqDNA聚合酶供應。標準緩沖液含:50mMKCl,10mMTris-HCl(pH8.3室溫),1.5mMMgCl2。Mg2+的濃度對反應的特異性及產量有著顯著影響。濃度過高,使反應特異性降低;濃度過低,使產物減少。在各種單核苷酸濃度為
人臍靜脈內皮細胞系傳代培養2022/11/14
細胞在培養瓶長成致密單層后,已基本上飽和,為使細胞能繼續生長,同時也將細胞數量擴大,就必須進行傳代(再培養)。傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以,而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。具體操作步驟:1、將長滿細胞的培養瓶中原來的培養液棄去。2、加入0.5—1ml0.25%溶液,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、瓶口塞好橡皮塞,放在倒置鏡下觀察細胞。隨著時間的推移,原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時將棄去,加入10ml培養液終止消化。
二抗特異性可考慮方面2022/11/07
二抗特異性是指一抗或免疫球蛋白被二抗識別的區域或鏈。可能需要實際運用的時候在考慮以下方面:1、抗IgG(H+L):一種具有(H+L)標記的二抗,靶向IgG分子的重鏈和輕鏈(即Fc和Fab區域)。這些抗體也會與其他類(如IgE、IgD等)發生反應,因為這些類之間共享輕鏈。更廣泛的表位識別(H+L)二抗使其適用于大多數需要二抗的免疫分析。2、抗iggFc片段或重鏈:與(H+L)二抗不同,以靶免疫球蛋白Fc區域或重鏈為靶點的二抗具有類特異性,不會與其他類免疫球蛋白發生反應。針對Fc片段的二抗被吸附在F
生物菌種幾種常用保藏方法2022/10/31
生物菌種幾種常用保藏方法:1.傳代培養保藏法又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(后者作保藏厭氧細菌用),培養后于4—6℃冰箱內保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進入,以減弱代謝作用。3.載體保藏法是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。4.寄主保藏法用于目前尚不能
PCR反應出現假陽性問題解疑2022/10/24
PCR反應時有時出現假陽性,表現出出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。1、引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。2、靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個基因組或大片段的交叉污染,導致假陽性。這種假陽性可用以下方法解決:操作時應小心輕柔,防止將靶序列吸入加樣槍內或濺出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質外,所有試劑或器
PCR反應條件的控制2022/10/17
PCR反應條件的控制:1.PCR反應的緩沖液提供合適的酸堿度與某些離子。2.鎂離子濃度總量應比dNTPs的濃度高,常用1.5mmol/L。3.底物濃度dNTP以等摩爾濃度配制,20~200umol/L。4.TaqDNA聚合酶2.5U(100ul)。5.引物濃度一般為0.1~0.5umol/L。6.反應溫度(1)變性溫度和時間95℃,30s。(2)退火溫度和時間低于引物Tm值5℃左右,一般在45~55℃。(3)延伸溫度和時間72℃,1min/kb(10kb內)。(4)Tm值=4(G+C)+2(A+
周期素G抗體的制備過程2022/10/10
周期素G抗體的制備過程:1.免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。4.免
寄生曲霉特性與分布2022/10/05
寄生曲霉(AspergillusparasiticusSpeare)真子囊菌亞綱,曲霉目,曲霉科,曲霉屬。黃曲霉AspergillusflavusLinkexFr.和寄生曲霉AspergillusparasiticusSpeare是已知能在玉米中產生黃曲霉毒素的僅有的兩種真菌。在玉米上,黃曲霉較寄生曲霉占優勢。受害籽粒上可見黃綠色的霉層。貯藏中的籽粒,其受害常常從籽粒下部開始,田間的果穗,其受害常從果穗頂部開始。這兩種曲霉分生孢子梗直立,頂部為一膨大的泡囊,泡囊上著生一行瓶狀小梗,每個小梗上著生
禽腺病毒PCR試劑盒使用方法2022/09/26
使用方法:一、稀釋標準曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。1.標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。3.在7號管中加入5μL陽性對照(濃度為1×10E8拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的標準曲線樣品。放冰上待用。4.換槍頭,在6號管中加入5μL1×10
探討區分胎牛血清的優劣方法2022/09/19
現在市場上的胎牛血清種類,即使是做過很多實驗的小伙伴也難免會踩到坑,很難去分清血清的優劣好壞。那么到底怎么才能區分胎牛血清的優劣呢?在這里給大家總結了以下幾點:1、看顏色根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響,這個指標的意義在于能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血后馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血
細菌接種與分離方法2022/09/13
大多數細菌均可以通過人工方法培養,只有將微生物培養出來才能對它進行研究、鑒定和應用。根據待檢標本的性質、培養目的和所用培養基的種類,采用不同的接種方法。1.平板劃線分離培養法對混有多種細菌,采用劃線分離和培養,使原來混雜在一起的細菌沿劃線在瓊脂平板表面分離,得到分散的單個菌落,以獲得純種。平板劃線分離法通常有兩種方法:①分區劃線分離法:此法常用于含菌量較多的細菌的分離。先用接種環挑取標本涂布于瓊脂平板1區(占培養基總面積的?)并作數條劃線,再于2、3、4區依次劃線。每劃完一個區域,均將接種環燒灼
新生牛血清采集與過濾2022/09/05
一種去除免疫球蛋白的新生牛血清方法:一、新生牛血清采集:首先對新生牛血清來源的牛群進行健康狀況調查,選擇無特定病原的黑白花奶牛生下的健康新生公牛(新生公牛不能吃初乳),通過無菌手術的方法在新生公牛頸靜脈采血,將采集到的新生牛血液用大容量冷凍離心機分離血清,將分離得到的牛血清置?20℃冷凍保存備用。二、新生牛血清過濾:將冷凍保存的新生牛血清解凍后進行過濾。1、第一次過濾新生牛血清,選取膜孔徑0.2微米、膜管面積0.5m2的陶瓷復合膜過濾裝置,膜管置高溫蒸汽壓力滅菌鍋內,在蒸汽溫度120℃、壓力0.
按重鏈抗原性分類的抗體主要功能2022/08/30
抗體依據重鏈抗原性的不同分為五類:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。各類抗體主要功能有:IgA:分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。IgM:是分子量最大,體內受感染后最早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。IgE:血清中含量最少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導I型超敏反應和抗寄生蟲感染。IgG:血清中含量最高,因此是最重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。I
生化試劑的技術分類2022/08/22
生化試劑的技術分類:1.生化分離與分析技術光譜技術已從單一的比色法發展為采用分光光度法、透射比濁法、原子吸收和火焰發射光譜法、分子熒光光譜法。分離技術除了一般的離心和超離心技術外,還有層析技術和電泳技術。層析技術包括薄層層析、凝膠層析、離心交換層析、親和層析、氣相層析、高效液相色譜(HPLC)等等。電泳技術中紙電泳、醋酸纖維膜電泳的應用已明顯減少,瓊脂糖電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAG)應用增多,目前已有自動電泳儀。2.自動分析與酶法分析近年來我國引進了自動生化分析儀用以監測酶活性,分析的酶范圍
冠蛋白3抗體制備過程2022/08/15
冠蛋白3抗體制備過程:1.免疫原的制備普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動物常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。4.免疫
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