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ATCC細胞發(fā)揮先天性免疫和適應性免疫共同作用2018/03/06

ATCC細胞在免疫應答的Z初階段,巨噬細胞通過識別外部真菌多糖配體被活化,啟動胞內(nèi)的信號轉(zhuǎn)導途徑,Z終發(fā)生吞噬能力增強,促進一氧化氮(nitrogenmonoxide,NO)產(chǎn)生和細胞因子分泌等一系列免疫反應。然而,真菌多糖刺激巨噬細胞表面受體作用機制的研究有待進一步深入,這些研究將幫助我們更好地理解免疫反應精細調(diào)控機制,尋找新型天然免疫調(diào)節(jié)劑。多糖(polysaccharide)是一種大分子活性物質(zhì),具有多種生物活性和功能,除了主要的免疫調(diào)節(jié)活性外,還具有抗氧化、抗腫瘤、抑菌等作用。許多研究表

促進原代細胞分化的研究2018/03/01

原代細胞分化是一個受到嚴格調(diào)控的生物學過程，對于動物個體發(fā)育和組織器官穩(wěn)態(tài)平衡具有重要作用。通過分化過程，能夠使細胞發(fā)生顯著變化，形成具有新特征和新功能的細胞。但一直以來，調(diào)控干細胞分化過程的細胞內(nèi)分子機制沒有得到*了解。在該項研究中，研究人員利用果蠅對干細胞分化所必需的基因進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)線粒體ATP合成酶在干細胞分化過程中發(fā)揮了重要作用。同時，研究人員還發(fā)現(xiàn)ATP合成酶在干細胞分化過程中發(fā)揮的作用并不依賴于其ATP合成功能，敲低氧化磷酸化系統(tǒng)其他組成成分抑制ATP合成并不會影響ATP合成酶

ATCC細胞活力數(shù)據(jù)的檢測2018/02/27

ATCC細胞主要是通過顯微鏡下形態(tài)學變化以及傳代培養(yǎng)周期的變化預估細胞生長生存狀態(tài)。這種主觀判斷既無法量化，也無法進行統(tǒng)計學分析。因此，目前對細胞存活質(zhì)量的判斷并沒有準確、客觀的統(tǒng)一標準，并且對體外培養(yǎng)細胞的存活質(zhì)量控制往往被科研工作者們“忽略”，從而導致實驗結(jié)果的不穩(wěn)定。體外細胞的有效培養(yǎng)新概念——“細胞質(zhì)控”。通過細胞活力、細胞凋亡、細胞周期、細胞增殖及DNA損傷五方面對細胞生長生存狀態(tài)進行的監(jiān)控。在這五個方面中，影響Z大的便是細胞活力，下面咱們專門來談一談細胞活力如何判斷。在體外細胞培養(yǎng)的

如何控制ATCC細胞生長2018/02/24

組織包含不同的ATCC細胞，這些細胞發(fā)揮著不同的作用以促進腫瘤生長。癌癥的發(fā)展和轉(zhuǎn)移被認為由一小群具有干細胞特點（包括具有自我更新、分化和耐藥能力等）的細胞引起。這些腫瘤干細胞也是初期治療成功后復發(fā)的原因。作為OncoTrack項目的一部分，查理特綜合癌癥中心（CCCC）的JosephRegan博士及其同事與馬克斯普朗克分子遺傳學研究所、格拉茨醫(yī)科大學和拜耳公司的研究人員合作研究了一種靶向清除腫瘤干細胞的療法。這種方法具有顯著提高療效的潛力，但是需要深入分析干細胞中相關(guān)的細胞交流信號通路以及調(diào)節(jié)

原代細胞潛在的標志物2018/02/10

在原代細胞中能檢測到EpCAM的表達,并且被認為是多能性人類胚胎干細胞的表面標記物。越來越多的證據(jù)表明,EpCAM可能是肝癌干細胞潛在的標志物,現(xiàn)有的研究已證明了以下幾點:(1)已知的肝干細胞標志物在EpCAM+細胞中高表達,而成熟肝細胞標志物在EpCAM–細胞中的表達明顯增高;(2)與EpCAM–細胞相比,Ep-CAM+細胞有更強的克隆形成能力;(3)EpCAM+細胞包含一個多潛能的細胞群,可分化為EpCAM+細胞和EpCAM–細胞;(4)NOD/SCID小鼠的體內(nèi)致瘤實驗表明,EpCAM+細

原代細胞生長狀態(tài)2018/02/08

1.首先，觀察原代細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。2.用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。3.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。4.靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)

兩條降解原代細胞內(nèi)物質(zhì)途徑2018/02/06

原代細胞內(nèi)物質(zhì)主要有兩條降解途徑：即蛋白酶體系統(tǒng)降解及自噬系統(tǒng)降解。蛋白酶體系統(tǒng)主要降解細胞內(nèi)的短壽命蛋白，而自噬則負責長壽命蛋白和部分細胞器的降解利用。因此，可以通過標記長壽命蛋白的降解產(chǎn)物來檢測自噬。將細胞與同位素標記的氨基酸共培養(yǎng)(多為14C或3H標記的纈氨酸或亮氨酸)數(shù)小時以標記長壽蛋白，再經(jīng)過一段潛伏期使蛋白酶體系統(tǒng)降解淘汰短壽命蛋白。隨后經(jīng)自噬刺激物誘導，細胞內(nèi)釋放出的降解蛋白產(chǎn)物通過放射性同位素法定量測定，從而獲得一個的數(shù)值。此方法可以比較客觀地反映細胞內(nèi)長壽蛋白的降解，而不是對自

原代細胞臨床意義2018/02/01

原代細胞在生理條件下，當Th1細胞占優(yōu)勢時，機體可產(chǎn)生細胞免疫亢進相關(guān)性疾病和遲發(fā)性超敏炎癥反應。Th1類細胞在類風濕關(guān)節(jié)炎、反應性關(guān)節(jié)炎、普通牛皮癬、EAE、多發(fā)性硬化癥等多種疾病中發(fā)揮重要作用，其分泌的細胞因子以干擾素-γ（IFN-γ）為主。干擾素-γ具有抗腫瘤和免疫調(diào)節(jié)作用。Th1應答主要是增強巨噬細胞介導抗感染的能力，尤其是在病毒、胞內(nèi)寄生蟲、原蟲感染中起主要作用。白介素-4（IL-4）當Th2細胞占優(yōu)勢時，機體可生產(chǎn)體液免疫亢進相關(guān)性疾病。Th-2類細胞以分泌白介素-4（IL-4）為主

原代細胞轉(zhuǎn)染復合物所用的稀釋劑2018/01/30

原代細胞轉(zhuǎn)染方案一般原則：建立一套適當?shù)霓D(zhuǎn)染方案;首先從一種標準方案開始，然后通過改變試劑/DNA的配比和復合物的劑量進行優(yōu)化。轉(zhuǎn)染復合物的制備——諸如轉(zhuǎn)染試劑/DNA配比，離子強度，緩沖液pH值，以及溫度等變量都會影響到轉(zhuǎn)染復合物的組成和功能。質(zhì)粒可用無菌水或TE緩沖液稀釋。如果您要使用一種市售的轉(zhuǎn)染試劑，就應當仔細閱讀該試劑所提供的使用說明。在不含血清或其他蛋白的培養(yǎng)基中制備轉(zhuǎn)染復合物;如果制備復合物所使用的培養(yǎng)基含有血清，它就會對轉(zhuǎn)染產(chǎn)生抑制。制備轉(zhuǎn)染復合物的孵育時間是一個非常關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，

原代細胞傳代次數(shù)2018/01/25

原代細胞傳代次數(shù)—傳代次數(shù)是指對一個細胞系進行分批傳代的頻度(通常在一個實驗室范圍內(nèi))。某些細胞系相比較其他細胞系而言較不穩(wěn)定，可能會隨著培養(yǎng)時間的延長而改變，視不同的細胞系和培養(yǎng)條件而定。因此名稱相同的同一細胞系在生理學和形態(tài)學(以及轉(zhuǎn)染能力)性質(zhì)也可能會有很大的差異。一般而言，細胞在凍存復蘇后的一兩代之內(nèi)或直到它們*復蘇之前都很難轉(zhuǎn)染。細胞數(shù)量(融合率)——只要培養(yǎng)基質(zhì)(組織培養(yǎng)皿)尚有空間，細胞就會按指數(shù)規(guī)律分裂。對于正常細胞而言，細胞生長的速度受細胞密度大小的抑制(接觸抑制)，但癌細胞則

原代細胞是如何擴散的？2018/01/23

原代細胞把自己包裹在絡(luò)絲蛋白中，并把自己偽裝成“朋友”以躲開大腦中免疫系統(tǒng)的偵查。就是從這些細胞開始，腫瘤在大腦形成。研究人員表示：“越來越多的癌患者活了下來，在被告知沒有腫瘤之后的幾年，大腦中又出現(xiàn)腫瘤。所以，我們想弄清為什么HER2癌比其他類型的癌更容易轉(zhuǎn)移到大腦，同時找到他們的生物弱點，開發(fā)抑制其發(fā)展的新藥。”在進行腦部手術(shù)之后，研究人員取得剩余的組織樣本，并與乳房切除術(shù)中取出的組織樣本進行比對，這些樣本來自同一名女性，他們比較了蛋白質(zhì)的表達，發(fā)現(xiàn)在之前乳房切除術(shù)中絡(luò)絲蛋白表現(xiàn)很低，然而轉(zhuǎn)

ATCC細胞轉(zhuǎn)染后陽性克隆的鑒定2018/01/18

ATCC細胞真核雙基因共表達載體phTERT-IRES-SV40轉(zhuǎn)染bMGEs,48h后用G418抗性藥物加壓篩選。約3周后,獲得陽性克隆,命名為HL-bMGEs,挑取單克隆擴大培養(yǎng)(圖3)。獲得的單克隆以“鋪路石”樣細胞類型生長。繼續(xù)擴大培養(yǎng),細胞仍以緊密單層生長方式增殖,細胞體外持續(xù)培養(yǎng)達30代依然生長旺盛。轉(zhuǎn)染后陽性克隆的RT-PCR鑒定分別從篩選出的陽性細胞HL-bMGEs和未轉(zhuǎn)染的bMEGs中提取基因組mRNA,RT-PCR擴增hTERT和SV40LT,陽性細胞基因擴增的產(chǎn)物長度為3.

原代細胞凍存法之真空冷凍干燥法2018/01/16

將原代細胞冷凍，在減壓下利用升華作用除去水分，使細胞的生理活動趨于停止，從而長期維持存活狀態(tài)。操作步驟如下：好氧菌冷凍干燥管的制備1安瓿管準備安瓿管材料以中性玻璃為宜。清洗安瓿管時，先用2%鹽酸浸泡過夜，自來水沖洗干凈后，用蒸餾水浸泡至pH中性，干燥后、貼上標簽，標上菌號及時間，加入脫脂棉塞后，121℃下高壓滅菌15-20分鐘，備用。2保護劑的選擇和準備保護劑種類要根據(jù)微生物類別選擇。配制保護劑時，應注意其濃度及pH值，以及滅菌方法。如血清，可用過濾滅菌；牛奶要先脫脂，用離心方法去除上層油脂，一

原代細胞克隆形態(tài)表現(xiàn)形式2018/01/11

原代細胞之間的相互作用加強細胞間的相互，維持干細胞的多能性。對于胚胎干細胞而言，與其周圍細胞保持接觸是至關(guān)重要的。中國學者李棟等人發(fā)現(xiàn)了有助于細胞接觸生長并能保證他們維持其多能性的一個調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。首先，這個課題組用一些化合物（蛋白激酶或者信號分子的抑制劑）對胚胎干細胞進行處理，篩選出對胚胎干細胞多能性有影響的化合物。他們發(fā)現(xiàn)Blebbistatin能夠刺激胚胎干細胞分離，其克隆形態(tài)變得扁平，而且擴散成為單個細胞狀態(tài)。Blebbistatin還能夠降低維持干細胞多能性的轉(zhuǎn)錄因子的活性，促進干細胞早期

原代細胞傳送功能2018/01/09

原代細胞盡管很小，但它卻有著非常的組織結(jié)構(gòu)——所有一切均各就各位。為了找到它們的合適位置，蛋白質(zhì)承載著一種信號。這些信號內(nèi)置在它們的結(jié)構(gòu)，功能就像是地址，細胞內(nèi)的“郵政服務(wù)"將它們傳送到正確的目的地。其中一個目的地就是細胞核。細胞核中包含著細胞的基因組信息——DNA。為了實現(xiàn)細胞分裂以及對環(huán)境做出響應，細胞必須讀取并將DNA解碼為新蛋白質(zhì)。核蛋白確保了這一過程正確運行。那當?shù)鞍滓馔膺M入到細胞核中即便它們并不屬于那里時會發(fā)生什么？會危害基因組信息的讀取，在某些條件下威脅整個細胞的存在。細胞的內(nèi)核膜

原代細胞的概念和性質(zhì)2018/01/05

原代細胞的性質(zhì)(1)具有巨大的比表面和表面能土壤膠體的一個顯著特點，是具有巨大的比表面和表面能。土壤中的砂粒和粗粉粒同黏粒相比，其比表面很小，甚至可以忽略不計，因此多數(shù)土壤的比表面決定于Z微小的黏粒部分。由于土壤礦質(zhì)膠體都是層狀構(gòu)造，有些礦質(zhì)膠體不僅具有很大的外表面，而且具有巨大的內(nèi)表面。在土壤礦質(zhì)膠體中，以蒙脫石類表面積Z大(600~800m2／g)，伊利石次之，高嶺石Z小(7～30m2／g)。土壤有機膠體的比表面也很大，如腐殖質(zhì)的比表面高達1000m2／g。由于土壤膠體具有巨大的比表面，相應

原代細胞的使用方法2018/01/03

原代細胞原料：em菌種1瓶、紅糖1公斤、水10公斤、20公斤水桶一個（帶蓋子，可密封）、飯鍋一個。*步：取水2公斤，加入鍋內(nèi)，然后將紅糖1公斤倒入鍋內(nèi)，開水煮沸，將紅糖*融化；第二步：將煮開的紅糖水倒入剩下的8公斤水中，加入水桶內(nèi)，拌勻；第三步：將em菌種打開倒入桶中，并攪拌均勻；第四步：用塑料布將桶口包扎，并蓋上蓋子，保證密封。第五步：20-40度的環(huán)境中，將水桶放置5-7天，中間可搖晃水桶2-3次，但是，不要打開。第五步：5-7天后，打開可聞到酸香味道，即為培育成功。開口使用后，盡量6個月內(nèi)

原代細胞對進行軟骨修復取得巨大進步2017/12/28

原代細胞開發(fā)并且檢測上述在大鼠體內(nèi)移植胚胎干細胞的步驟或許可以幫助開發(fā)治療關(guān)節(jié)炎患者的相應療法，而研究者希望這種移植過程不僅可以產(chǎn)生新型健康的軟骨組織，而且更重要的是不帶來任何副作用，比如生長異常、組織紊亂或腫瘤生成等。來自成體干細胞生成的軟骨細胞當前正在進行實驗性應用，但由于其并不能實現(xiàn)大量生產(chǎn)因此誘導分化的操作程序就相應地變得昂貴起來。由于胚胎干細胞具有特殊的增殖能力，其可以被通過誘導分化成為任何成熟的細胞，從而就有可能實現(xiàn)大量軟骨細胞的產(chǎn)生，目前研究者開發(fā)的新型生產(chǎn)過程具有強大的潛力生產(chǎn)大

ATCC細胞靜止狀態(tài)2017/12/26

當一個ATCC細胞不分裂時，稱為靜止狀態(tài)，絕大多數(shù)的細胞結(jié)構(gòu)是不斷變化的，但初級纖毛是相對穩(wěn)定的。Inoue和他的團隊試圖了解，是什么原因致使一個細胞退出靜態(tài)并開始有絲分裂時發(fā)生“理發(fā)”，在有絲分裂過程中，復制的染色體分裂并填入兩個新“姊妹”細胞中。他們首先比較了具有更多和更少Inpp5e酶的細胞，而以前的研究認為認為這種酶參與了纖毛的穩(wěn)定性。向靜態(tài)小鼠胚胎細胞中的纖毛膜加入熒光標記后，研究人員拍攝了纖毛的。它們似乎被切斷，并且每隔幾小時就漂走一次。在缺失Inpp5e基因的細胞中，當給予細胞進行

原代細胞與細胞互動是隨機的2017/12/21

研究人員一直在研究控制原代細胞的方法，以觀察兩個細胞膜之間的直接接觸，或控制它們保持各種距離，研究細胞之間是怎樣通訊的。聲鑷的價值在于可用它來研究細胞之間的信息傳遞。它能把細胞分開的距離，或讓細胞按預定設(shè)計相互接觸。光鑷也能在某種程度上做到這些，但會把樣本加熱。研究人員預想的聲鑷設(shè)備和手機大小差不多，能控制數(shù)千通量的細胞。通過改變聲場可操控細胞而不會造成傷害。由于聲鑷是以一種垂直隧道的方式工作，細胞能保持所含液體，研究人員能捕獲細胞使其懸浮，或把它們排在基質(zhì)表面。在實驗中，研究人員把4個聲源相對