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生物菌種注意事項簡介2017/08/09
生物菌種注意事項簡介收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮荆堅炷H〔暮螅瑢吮炯皶r分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選
海洋微生物菌種樣本處理及要求說明書2017/08/07
海洋微生物菌種樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。注意事項:
海洋微生物菌種樣本處理及要求2017/08/04
海洋微生物菌種樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培
海洋微生菌種物標本的采取和保存2017/08/02
海洋微生菌種物標本的采取和保存通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步,下面簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4
海洋微生菌種物測定步驟2017/07/31
海洋微生菌種物測定步驟使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。推薦所有的樣本、標準和對照測定雙份。1.準備所有的試劑和工作標準品。2.取下多余的微量培養(yǎng)板條,放回裝有干燥劑的錫箔袋中,重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul標準品、樣本和對照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時。記錄測定標準和樣本的分布。5.吸棄孔內(nèi)液體,每孔400ul洗滌液,充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復(fù)洗滌4次。6.每孔加入200ulIL-6Conju
生物菌種標本及采集2017/07/28
生物菌種標本及采集、貯運因素:(1)鯉魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA試劑盒嚴重溶血,以HRP為標記的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性;(2)混有紅細胞的血清易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;(3)如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng);(4)標本凝固不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;(
海洋微生菌種物操作步驟如下2017/07/26
海洋微生菌種物操作步驟如下:⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他抗體及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合,在洗滌過程中被洗去。⑶加酶標抗抗體:與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。⑷加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。本法主要用
生物菌種測定步驟2017/07/24
生物菌種測定步驟使用前將所有IL-6ELISA試劑盒和樣本平衡至室溫。推薦所有的樣本、標準和對照測定雙份。1.準備所有的試劑和工作標準品。2.取下多余的微量培養(yǎng)板條,放回裝有干燥劑的錫箔袋中,重新密封。3.每孔加入100ulAssayDiluentRD1W。4.每孔依次加入100ul標準品、樣本和對照。用橡皮條密封。室溫孵化2小時。記錄測定標準和樣本的分布。5.吸棄孔內(nèi)液體,每孔400ul洗滌液,充分洗滌后*去除液體。在干凈的紙上拍干。反復(fù)洗滌4次。6.每孔加入200ulIL-6Conjugat
海洋微生菌種物處理方法2017/07/21
海洋微生菌種物處理方法通常我們可用于ELISA檢測的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等,不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準確性的*步,下面簡單介紹一下不同類型的樣本的處理方法。血清血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃過夜,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃
海洋微生菌種物注意事項說明書2017/07/19
海洋微生菌種物注意事項1.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得的實驗結(jié)果,zui好在取樣2h內(nèi)進行實驗,樣品存放時間越長,細胞分離效果越差。樣品放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。2.本實驗不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。3.吸取過多的單個核細胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細胞被吸出從而使混雜的粒細胞數(shù)量增加。4.
林業(yè)菌種標本的采集及保存2017/07/14
林業(yè)菌種標本的采集及保存:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。4.
生物菌種雙抗原夾心法測抗體2017/07/10
生物菌種雙抗原夾心法測抗體反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標記方法。雙位點一步法在雙抗體夾心法測定抗原時,如應(yīng)用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體,則在測定時可使標本的加入和酶標抗體的加入兩步并作
海洋微生菌種物注意事項2017/07/07
海洋微生菌種物注意事項⒈正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。⒉在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:⑴固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)
生物菌種注意事項2017/07/03
生物菌種注意事項從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。6.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按生物廢棄物處理。終止液為2M硫酸,使用時必須注意安全。7.各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校準其準確性,以避免試驗誤差
生物菌種樣品采集和存儲2017/06/30
生物菌種樣品采集和存儲:血清:使用血清分離管(SST)和全血標本在室溫下兩小時或4℃過夜℃,然后離心15分鐘,在1000×g下。刪除上清即可檢測,或分裝和店內(nèi)樣品在-20°C或-80°C。但應(yīng)避免反復(fù)凍融循環(huán)。等離子:采集血漿中EDTA或肝素作為抗凝血劑。在2-8°C在30分鐘內(nèi)收集離心15分鐘,1000×G。即可檢測,或分裝保存樣本在-20°C或-80°C。但應(yīng)避免反復(fù)凍融循環(huán)。檢測程序:在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測定前。據(jù)建議,所有樣品和標準來測定一式兩份。1。準備好
海洋微生菌種物檢測原理2017/06/28
海洋微生菌種物檢測原理試劑盒采用雙抗原一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人庚型肝炎病毒的包被微孔中,依次加入標本、HRP標記的檢測抗原,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中人庚型肝炎病毒IgG(HGV-IgG)的存在與否。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后
海洋微生菌種物樣本處理及要求2017/06/26
海洋微生菌種物樣本處理及要求1.血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000g離心20分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結(jié)果),稱重后將*碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的
海洋微生菌種物原理2017/06/23
海洋微生菌種物原理:采用雙抗體夾心法測定大鼠白細胞介素4(IL-4)水平。用純化的大鼠白細胞介素4(IL-4)抗體包被微孔板,制成固相載體,實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品,并加入HRP標記的白細胞介素4(IL-4)抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,反復(fù)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化為藍色,再用硫酸終止反應(yīng),轉(zhuǎn)變成黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-4含量呈正相關(guān)。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據(jù)標準曲線,計算測試樣品中白細胞介素4(IL-4)濃度
海洋微生菌種物操作步驟2017/06/21
海洋微生菌種物實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中豬免疫球蛋白E(IgE)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入免疫球蛋白E(IgE),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的免疫球蛋白E(IgE)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬免疫球蛋白E(IgE)濃度。操作步驟1.標
海洋微生菌種物實驗原理2017/06/19
海洋微生菌種物實驗原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中犬二胺氧化酶(DAO)水平。用純化的犬二胺氧化酶(DAO)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入二胺氧化酶(DAO),再與HRP標記的二胺氧化酶(DAO)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二胺氧化酶(DAO)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中犬二胺氧
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