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其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果2017/12/20
其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。2.實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。3.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。4.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。5.要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但有專。人員進(jìn)行矯正。6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。主要作用1.胎牛血清提
人elisa定量檢測(cè)試劑盒處理方法有2017/12/18
人elisa定量檢測(cè)試劑盒處理方法有:1、存放廢液的桶必須遠(yuǎn)離電源、氣源、火源,采取嚴(yán)格的安全措施。2、必須倒入的收集桶內(nèi),嚴(yán)禁倒入下水道。3、凡存放廢液的桶上必須用標(biāo)簽紙標(biāo)明所存廢液的主要成分名稱。4、嚴(yán)禁將化學(xué)試劑瓶(包括空瓶或裝有廢液的瓶)扔進(jìn)桶內(nèi)(包括空桶或已裝有廢液的桶),以免給后續(xù)的收集處理造成困難和麻煩。5、桶內(nèi)廢液存放至五分之四時(shí),請(qǐng)置換新桶。6、桶內(nèi)倒入廢液后必須將桶蓋蓋緊,以防揮發(fā)、溢出等引發(fā)安全隱患。實(shí)驗(yàn)中主要注意到:1、滴加試劑前應(yīng)將滴瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,使液體混勻。滴加時(shí)瓶身應(yīng)
elisa定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定步驟2017/12/15
elisa定量檢測(cè)試劑盒測(cè)定步驟1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。3.在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)安全性2017/12/11
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)安全性1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。5.小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)?中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)儀器保養(yǎng)2017/12/08
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)儀器保養(yǎng):1、儀器的接地:接地的問題除對(duì)儀器的性能、可靠性有影響外,還對(duì)使用者的人身安全關(guān)系重大,因此所有接入市電電網(wǎng)的儀器必須接可靠的地線。2、電源電壓:由于市電電壓波動(dòng)比較大,常常超出要求的范圍,為確保供電電源的穩(wěn)定,必須配用交流穩(wěn)壓電源。要求高的儀器單獨(dú)配備穩(wěn)壓電源。另外應(yīng)注意,插頭中的電線連接應(yīng)良好,使用時(shí)切莫把插孔位置搞錯(cuò),導(dǎo)致儀器損壞。3、儀器工作環(huán)境:環(huán)境對(duì)精密檢測(cè)儀器的性能、可靠性、測(cè)量結(jié)果和壽命都有很大影響,為此對(duì)它有以下幾方面的要求:防塵,防潮,防
大鼠elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本2017/12/06
大鼠elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2-8度保存3天。-20度保存一個(gè)月。3.尿液、胸腹水、腦脊液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(200
elisa定量檢測(cè)試劑盒基本信息2017/12/04
elisa定量檢測(cè)試劑盒基本信息(myoglobin,MYO,Mb)是由一條肽鏈和一個(gè)血紅素輔基組成的結(jié)合蛋白,是肌肉內(nèi)儲(chǔ)存氧的蛋白質(zhì),它的氧飽和曲線為雙曲線型。肌紅蛋白的基本知識(shí):肌紅蛋白存在于肌肉中,心肌中含量特別豐富。抹香鯨肌紅蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)于1960年由Kendrew用X線衍射法闡明,這是世界上個(gè)被描述的蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)。由于三級(jí)結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能直接相關(guān),而且三級(jí)結(jié)構(gòu)的分析工作難度很高,所以這項(xiàng)工作獲得學(xué)術(shù)界的非常高的評(píng)價(jià)。操作特點(diǎn)1.專一性強(qiáng)。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶
其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作2017/12/01
其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)內(nèi)標(biāo)法的操作:①將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品,制成混合標(biāo)樣,并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣。混合標(biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。②注入色譜柱,以(標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積)為響應(yīng)值。③根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。④將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品,注入色譜柱,得到欲測(cè)組分的響應(yīng)值。⑤根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測(cè)組分的濃度。室內(nèi)質(zhì)量控制程序:1)確定控制的對(duì)象。2)規(guī)定控制對(duì)象的標(biāo)準(zhǔn)(預(yù)期值)。3)制定或選擇控制方法和手
人elisa定量檢測(cè)試劑盒基本信息2017/11/29
人elisa定量檢測(cè)試劑盒基本信息抗利尿激素(又稱血管升壓素)是由下丘腦的視上核和室旁核的神經(jīng)細(xì)胞分泌的9肽激素,經(jīng)下丘腦—垂體束到達(dá)神經(jīng)垂體后葉后釋放出來。其主要作用是提高遠(yuǎn)曲小管和集合管對(duì)水的通透性,促進(jìn)水的吸收,是尿液濃縮和稀釋的關(guān)鍵性調(diào)節(jié)激素。此外,該激素還能增強(qiáng)內(nèi)髓部集合管對(duì)尿素的通透性。操作方法1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃
其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒樣本處理的具體方法2017/11/24
其他類elisa定量檢測(cè)試劑盒樣本處理的具體方法1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參
人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)方法2017/11/22
人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)方法:本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。用抗小鼠IgG單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的IgG與單抗結(jié)合,加入酶標(biāo)抗體,形成免疫復(fù)合物連接在板上,加入酶底物TMB,出現(xiàn)藍(lán)色,加終止液硫酸,顏色變黃,在450nm處測(cè)OD值,IgG濃度與OD值成正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IgG濃度。操作步驟:實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中過失的方法2017/11/20
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中過失的方法:1、檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。2、操作前仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。3、評(píng)估試劑盒的實(shí)用性,試劑盒的穩(wěn)定與否,對(duì)準(zhǔn)確率的高低很重要。4、加樣要準(zhǔn)確、快速。5、使用校對(duì)過的微量移液器,排除自然誤差。6、嚴(yán)格掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過短,加入終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過少,易出現(xiàn)假陰性。7、洗滌*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽性。8、嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng),酶失活,反應(yīng)時(shí)間過短,酶結(jié)合物不能與血清
sa定量檢測(cè)試劑盒雙抗夾心法操作流程2017/11/17
elisa定量檢測(cè)試劑盒雙抗夾心法操作流程:1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。3.加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小
人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟2017/11/15
人elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)開始前,將-20℃冰箱里的試劑盒中的試劑溶液放進(jìn)冰槽里融化。然后進(jìn)行下列操作。一、樣品準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備好25cm2細(xì)胞培養(yǎng)瓶或60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿的待測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞(5X106細(xì)胞)2.小心加入xx毫升預(yù)冷的SBJ清理液(試劑A),覆蓋生長(zhǎng)表面3.小心抽去清理液4.使用細(xì)胞刮脫棒輕柔刮脫細(xì)胞5.加入xx毫升SBJ清理液(試劑A),混勻細(xì)胞6.移入到預(yù)冷的15毫升錐形離心管(注意:懸浮細(xì)胞從這一步驟開始)7.放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心5分鐘,速度為300g8.小心抽去上清液
elisa定量檢測(cè)試劑盒操作流程2017/11/13
elisa定量檢測(cè)試劑盒操作流程:1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)必知小知識(shí)分享2017/11/10
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)必知小知識(shí)分享:(1)購買后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)。(2)在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的安全對(duì)策。(3)必須戴好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。(4)做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制。(5)對(duì)沒有標(biāo)明其危險(xiǎn)特性ELISA試劑盒也要慎重地進(jìn)行操作。(6)參照相關(guān)法規(guī),文獻(xiàn),MSDS等信息,理解并掌握好試劑盒的特性,再進(jìn)行安全操作。(7)通常購買時(shí)要想到一次性用完,若估算不足有剩余的話,要更加注意其保管和管理。(8)對(duì)于使用后的廢棄物,不要或舊的試劑盒,
大鼠elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法2017/11/08
大鼠elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟2017/11/06
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟1.100ml含重組表達(dá)質(zhì)粒的菌體誘導(dǎo)后,離心5000g×5min,棄上清,收獲菌體,用10ml預(yù)冷的B/W緩沖液重懸。2.重懸液于冰上超聲處理,直至樣品不再粘稠,4℃離心14000g×30min,取上清液,0.45μm膜抽濾后作為樣品液。3.將結(jié)合T7Tag抗體的瓊脂充分懸起,平衡至室溫,裝入層析柱中。4.B/W緩沖液平衡后樣品液過柱。5.10mlB/W緩沖液過柱,洗去未結(jié)合蛋白。6.用5ml洗脫緩沖液過柱,每次1ml,洗脫液用含150μl中和緩沖液的離心管收集
elisa定量檢測(cè)試劑盒說明書檢測(cè)原理2017/11/01
elisa定量檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被c-Jun氨基末端激酶(JNK)抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的c-Jun氨基末端激酶(JNK)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作流程2017/11/01
elisa定量檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作流程1.如果一次只做一部分孔,貼膜可以剪刀剪開,只用一部分。保證膜可以把加液后的孔蓋住就可以。2.加樣時(shí)候,一定要保證每孔加樣量*一樣。避免因?yàn)椴僮髟颍靠滓后w量有區(qū)別。ELISA比較敏感,操作誤差會(huì)導(dǎo)致zui后讀數(shù)有不小的差別。3.加的樣,保證樣品加在孔底,不要粘在管壁上,減少孔與孔之間的差異。第二天早上,來洗掉包被液。樣本加樣:血清或者細(xì)胞上清,解凍之后混勻,建議3000RPM離心10分鐘,沉淀液體中的固體雜質(zhì)。按照順序,每孔加100ul樣本,記得做復(fù)孔。加
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