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貨號	FS-X10052

培養操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中，使蓋玻片*浸在培養液中；

5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3面積時，將培養板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

中文名稱：Gill蘇木素染色液(Gill No.3)

英文名稱：

產品規格：100ml|500ml

貨號：FS-X10052

產品介紹:

用途：

退行性染色液，適用于石蠟切片染色

注意事項：

Gill No.3蘇木素染色液又稱GillⅢ液，為正常濃度的2倍，石蠟切片染色大于15分鐘。屬于半氧化蘇木素，比Harris蘇木素穩定，染色需鹽酸乙醇分化，其缺點是：黏附的明膠甚至玻片也會染色。

儲存條件：室溫，12個月

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

路德酵母7號染色體開放閱讀框13抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) 人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒

藍色犁頭霉7號染色體開放閱讀框29抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) 人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒

貪噬菌屬8號染色體開放閱讀框72抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) 人巨噬來源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒

賴芽孢桿菌7號染色體開放閱讀框30抗體Human CD5L(CD5 antigen-like) 人巨噬集落激因子受體(M-CSFR)免疫試劑盒

奇異球菌7號染色體開放閱讀框57抗體Human FAM3B(Protein FAM3B) 人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

膠紅酵母7號染色體開放閱讀框36抗體Human MYOF(Myoferlin) 人巨噬激蛋白(MSP)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○1547號染色體開放閱讀框42抗體Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) 人巨泌乳免疫試劑盒

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種7號染色體開放閱讀框43抗體Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) 人鹽抵抗的性磷(TRAP)免疫試劑盒

冷海水黃桿菌7號染色體開放閱讀框44抗體Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) 人相關抗原9(SPAG9)抗體免疫試劑盒

暗產色鏈霉菌*8號染色體開放閱讀框40抗體Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) 人相關抗原7(SPAG7)免疫試劑盒

亮白曲霉8號染色體開放閱讀框37抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) 人精脒/精N(1)-乙酰轉移樣蛋白1(SATL1)免疫試劑盒

枇杷葉點霉8號染色體開放閱讀框45抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) 人精合成(SRM)免疫試劑盒

膠柱頭孢霉屬8號染色體開放閱讀框80抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) 人精酰-tRNA合成(RARS)免疫試劑盒

Paenibacillus taichungensis9號染色體開放閱讀框3抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) 人精脫羧(ADC)免疫試劑盒

植物乳桿菌8號染色體開放閱讀框47抗體Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) 人精2(ARG2)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌8號染色體開放閱讀框48抗體Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) 人精(Arg)免疫試劑盒

尖鐮孢萎蔫專化型（棉花枯萎病菌）Fusarium│oxysporum f. sp. vasinfectum 質量規格：IND Liprin alpha 1 三七皂R2(S型)

藍色鏈霉菌Streptomyces│cyaneus 質量規格：IND KIAA1199 異夏佛塔

假木豆根瘤菌Rhizobium│sp. 質量規格：AR,90%白頭翁皂E-3
Gill蘇木素染色液(Gill No.3)硬結節桿 4-甲基鄰苯二白關聯球蛋白樣受體1

鞘氨 4-氟-2-甲白關聯球蛋白樣受體2

*灰葡萄孢甘油縮甲γ谷氨酰轉移

糞腸球 3-溴-5-甲甲酯（易）酪激受體B

毛霉屬環戊基苯β位淀粉樣前體蛋白裂解2

弓形蟲(GJS-3株) 鹽特拉唑磷化蛋白激C亞性D型

北京擲孢酵母 2-甲氧基-6-突觸核蛋白β

蓋替隱球酵母 1,4-二溴-2,3-丁二酮豐富重復G蛋白偶聯受體5

淺灰小雙孢 1-(4-吡啶基)酮激錨定蛋白4

廣西腐霉 3-氨基-2-吡啶緊密連接蛋白4

黑曲霉 4-環己酮羧甲酯可溶性Klotho蛋白

空腸彎曲桿 5--1H-吡咯并[2,3-B]吡啶不飽和脂肪

近緣毛殼 3-乙酰氨基鄰苯二甲酐飽和脂肪

鞘氨桿 1,7-二-4-氧雜庚烷人可溶性Endoglin

釀酒酵母 5-香草蛋白激D2
操作規程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)