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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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臺(tái)盼藍(lán)染色液

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-11 15:58:31瀏覽次數(shù):535次

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貨號(hào) FS-X9839
臺(tái)盼藍(lán)染色液正在熱銷的產(chǎn)品:HBsAg 人肝表面抗原抗體四溴化 AR
HBsAg 人型肝炎表面抗原單克隆抗體(檢測(cè))苯二異酯 98%(劇品)
HBcAg 人型肝炎核心抗原單克隆抗體苯二異酯 Standard for GC(劇品)
HBeAg(1) 人肝e抗原抗體(1)苯硫酚 99%(劇品)
HBeAg(2) 人型肝炎e抗原單克隆抗體(2)四溴化 離子對(duì)色譜級(jí),≥99.0% (AT)
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產(chǎn)品介紹:

臺(tái)盼藍(lán)染色液主要用于細(xì)胞染色,用來檢測(cè)細(xì)胞的存活率。臺(tái)盼藍(lán)受到活體細(xì)胞的排斥,而死亡細(xì)胞攝入染料顯示藍(lán)色。通過常用的光學(xué)顯微鏡可以觀察到細(xì)胞染色情況,同時(shí)可以定量計(jì)數(shù),實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞存活率比較精確的定量分析。

儲(chǔ)存條件:4℃保存。

有效期:一年。

中文名稱:臺(tái)盼藍(lán)染色液

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:100T

貨號(hào):FS-X9839

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

乙阿比特龍酯英文名: Dorzolamide HCl富含半胱C端蛋白1抗體包裝5g

異環(huán)磷酰英文名: Doxazosin MesylateE1A激活基因激蛋白2抗體包裝1g

扎西他濱,2',3'-二脫氧胞英文名: Doxazosin Mesylate壁合成蛋白43抗體包裝5g

子囊霉英文名: Doxorubicin HCl/Adriamycin19號(hào)染色體開放閱讀框29抗體包裝1g

紫杉英文名: Doxorubicin HCl/Adriamycin磷化p21蛋白抗體包裝250mg

左亞葉鈣;酰四氫葉鈣英文名: Doxycycline HCl磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝25g

阿卡地新(AICAR)英文名: Doxycycline HCl磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體包裝5g

阿利克侖半富馬鹽英文名: Menadione磷化周期依賴性激2抗體包裝100g

阿齊沙坦英文名: Menadione磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體包裝25g

阿司,阿西莫司英文名: Econazole nitrate磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑抗體包裝25g

折地平英文名: Econazole nitrate磷化α-連環(huán)蛋白抗體包裝5g

安倍生坦英文名: Entecavir周期E2抗體包裝5g

力農(nóng)英文名: Entecavir磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體包裝250mg

地平英文名: Epalrestat 腫瘤易感候選基因3抗體包裝100g

奧美沙坦;奧美沙坦英文名: Epirubicin HCl磷化腫瘤易感候選基因3抗體包裝25g

華癸中間根瘤菌Mesorhizobium│huakuii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胰島淀粉樣多肽試劑盒鹽堿;Ephedrine hydr

CBS7227=IFO10179資源名稱: 假白布勒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>95%脂溶性的原激活肽試劑盒原人參三;Protopanaxatri

棲熱菌Thermus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR原Ⅱ試劑盒原人參二;Protopanaxdiol
臺(tái)盼藍(lán)染色液中國(guó)克魯維酵母 6-水楊重組人脂肪因子

黃色短桿 N,N',N'',N''',N'''',N'''''-六-O-乙酰基殼六糖成纖維生長(zhǎng)因子13

猴頭 制霉藥敏紙片補(bǔ)體C5轉(zhuǎn)化

金黃殼囊孢 氨芐青霉藥敏紙片特異性IgG抗體

貝雷絲孢酵母 異鋁KI67抗原

球孢白僵 丁香連氮β肌動(dòng)蛋白

總狀毛霉 大孔樹脂XDA-1β肌動(dòng)蛋白

沼澤紅假單胞 D-腺病抗體

大腸埃希氏 愈創(chuàng)木酚支原體

溶桿 鄰苯二甲核因子κB抑制物激

串珠鐮刀 羊毛脂總膽固

氧化微桿 雙酚 白介13

核青霉 高效氟菊酯凝血

類芽孢桿 環(huán)沙星FAT4

明尼蘇達(dá)被毛孢 鄰苯二甲二癸酯高分子量脂聯(lián)

 


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