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試劑盒收到后使用說明2025/02/24

1、收到試劑盒后請注意事項：①收到試劑盒后，檢查外包裝有無破損，打開試劑盒找到說明書，按照說明書中對于試劑種類和狀態的描述，清點試劑種類和數量是否正常。②按照說明書的要求，把試劑放到對應溫度的冰箱或者冷藏室保存。③收到試劑盒后，請盡快使用。為了保證測定質量，試劑盒開封后一般應該在一個月內用完。2、預實驗①選擇2-3個預期差異比較大的樣品。②按照說明書配制試劑，包括粉劑和自備試劑。注意：現配現用的試劑，一定要在檢測前再配置，避免試劑配制之后放置時間太久！③嚴格按照說明書進行稱量、勻漿、離心、取樣、

PCR反應主要成份之引物介紹2025/02/17

PCR反應產物的特異性由一對上下游引物所決定。引物的好壞往往是PCR成敗的關鍵。引物設計和選擇目的DNA序列區域時可遵循下列原則：1、引物長度約為16-30bp，太短會降低退火溫度影響引物與模板配對，從而使非特異性增高。太長則比較浪費，且難以合成。2、引物中G+C含量通常為40%-60%，可按下式粗略估計引物的解鏈溫度Tm＝4(G+C)+2(A+T)。3、四種堿基應隨機分布，在3'端不存在連續3個G或C，因這樣易導致錯誤引發。4、引物3'端最好與目的序列閱讀框架中密碼子第一或第二位核苷酸對應，以

細胞傳代培養實驗原理及步驟2025/02/10

實驗原理:傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。實驗步驟:1.入無菌室之前用肥皂洗手，用75%酒精擦拭消毒雙手。2.倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。3.超凈臺臺面應整潔，用0.1%新潔爾滅溶液擦凈。4.打開超凈臺的紫外燈照射臺

抗體特異性的選擇考慮方面2025/02/05

特異性的選擇主要需要考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、實驗方法特異性、標記物的特異性。1、蛋白特異性針對需要檢測的蛋白查找抗體，幾個細節要區分：a.重組蛋白如果不是全長表達，則需要注意抗體的免疫原區域是否在重組蛋白區域內。b.內源性蛋白最好能清楚其剪切與修飾的方式，特殊表型的蛋白需要進行序列比對，并結合抗體免疫原序列，查看交叉反應的情況。c.磷酸化蛋白檢測需要確定具體位點，不同位點的磷酸化意味著可能有不同的機制存在，不宜一概而論。2、種屬特異性同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。a.目前大

細胞傳代培養具體過程2025/01/20

當培養的細胞增殖達到一定密度后，將會出現密度抑制現象，表現為細胞的生長和分裂速度逐漸減慢，甚至停止。貼壁細胞會在培養瓶中長成致密單層(懸浮細胞會充滿整個體積的培養液)，鋪滿培養瓶底部，此時如果不及時進行分裝再培養，即傳代培養，細胞將逐漸走向衰老、死亡，將培養的細胞從一個容器以適當比率轉移到其他容器中擴大培養，稱為傳代培養。細胞傳代培養（消化法）具體過程：一、傳代前準備：1.預熱培養用液：把已經配制好的裝有培養液、PBS液和yi蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。2.用75％酒精擦拭經過紫外線照射

抗體的制備過程2025/01/13

抗體的制備過程：1.免疫原的制備普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。2.免疫動物常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免疫血清的收集一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。4.免疫血

血清的質量把控要素2025/01/06

在細胞培育試驗中，血清一般作為基礎生長培育基的添加劑。而在試驗進程中是否挑選添加血清，主要依據基礎培育基化學成分，培育細胞的類型和培育系統而定。血清的質量大大的影響到試驗作用，血清的質量把控要素如下：1、血清的采集在出產進程中，全血運用無菌一次性塑料袋搜集，待凝聚后分離，搜集和冷凍貯存血清。操控初始搜集是操控最終血清產質量量的關鍵因素。只要初始質料符合咱們的規范時才干答應出產。2、產質量料的挑選在商場存在兩個胎牛血清規范：美國農業部規范（USDA）和歐洲規范。美國農業部規范，原始血清必須采自未發

NK與NKT細胞的區別小結2024/12/24

NK與NKT細胞的區別：1、細胞類別：NK是機體重要的免疫細胞；NKT（naturalkillerT)細胞是一群細胞表面既有T細胞受體TCR，又有NK細胞受體的特殊T細胞亞群。2、細胞作用：NK不僅與抗腫瘤、抗病毒感染和免疫調節有關，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發生，識別靶細胞、殺傷介質；NKT細胞共表達T細胞受體和NK細胞受體。3、產生來源：NK細胞直接從骨髓中衍生；NKT細胞克隆定量。NK與NKT細胞的相同點都是機體重要的免疫細胞。

實驗室安全管理制度是什么？2024/12/17

實驗室安全包括防火防爆、防毒、防菌、防腐蝕、消防辦法。實驗室安全管理制度：一、嚴格按照學院綜合治理管理的要求，制定各實驗室的安全管理制度。二、認真做好“防水、防火、防盜”工作。上下班認真檢查實驗室的門、窗、水龍頭是否關好，電源是否關閉。三、對來實驗室聯系工作的人員要做到熱情接待、認真記錄、及時匯報。四、將消防器材放在明顯易取的位置。實驗室內（除實驗需要外）禁止使用電爐子等用電量大的儀器，以防火災的發生。五、各實驗室要定期檢查所管實驗室的電源系統，對于安全隱患要做到發現及時，處理得當。六、電算中心

PCR 反應體系由什么組成？2024/12/09

PCR反應體系由反應緩沖液（10×PCRBuffer）、脫氧核苷三磷酸底物（dNTPmix）、耐熱DNA聚合酶（Taq酶）、寡聚核苷酸引物（Primer1，Primer2）、靶序列（DNA模板）五部分組成，各個組份都能影響PCR結果的好壞。1、反應緩沖液：一般隨TaqDNA聚合酶供應。標準緩沖液含：50mMKCl，10mMTris-HCl（pH8.3室溫），1.5mMMgCl2。Mg2+的濃度對反應的特異性及產量有著顯著影響。濃度過高，使反應特異性降低；濃度過低，使產物減少。在各種單核苷酸濃度為

酶聯免疫吸附試驗（ELISA）保存問題把控2024/12/02

酶聯免疫吸附試驗（ELISA）因其操作簡單，靈敏度高，特異性好，經濟安全等特點而在臨床上廣泛應用，但是由于其操作步驟復雜，一般包括試劑準備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結果判定等，其中任何一項操作不當都會對檢測結果產生很大影響。因此，必須加強ELISA檢測的全面質量控制，保證其結果的準確可靠。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）保存問題把控：1、ELISA試劑盒要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP為標記酶的ELISA試劑盒測定中，如血清

標準物質的作用主要表現2024/11/26

標準物質作用的五個主要表現：1、用作校準標準一是用標準物質檢定儀器的計量性能是否合格，如響應曲線、精密度、靈敏度、檢測限與穩定性等，可選用與儀器測量范圍相宜、量值成梯度的系列標準物質，從量值最小的標準物質開始，逐個測定。二是用標準物質做校準曲線，為實際樣品建立定量關系，此時應選擇與被測樣品基體相匹配的系列標準物質，用與測定樣品相同的方法和測量條件，逐個測定。以上兩種情況的實驗設計和數據處理均基于最小二乘法線性回歸原理。2、用作工作標準用標準物質做測量工作標準，給物質或材料賦值。應選用一種基體與量

常見類別血清不同之處歸納2024/11/18

血清（serum）是指在凝固后，將紅細胞、白細胞和血小板等細胞成分除去后所剩下的液體部分。它由水、蛋白質、糖類、激素、酶、電解質和其他生物分子組成。血清可以通過離心或其他方法從全血中分離出來，并可用于研究許多方面的生物學過程。血清有以下常見四種類別，它們的胎齡：胎牛血清（FBS)胎兒(母牛懷孕3-8個月)新生牛血清(NCS)出生10日內小牛血清（BCS）16-22周供體血清成年牛1.采血方式不同胎牛血清：母牛懷孕3-8個月時，采用剖腹心臟密閉穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供體牛血清：分別是取自新

細胞培養基本條件是什么？2024/11/04

細胞培養(cellculture)也稱細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。細胞培養技術可以由一個細胞經過大量培養成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必要的環節，而且細胞培養本身就是細胞的克隆。細胞培養基本條件：1、合適的細胞培養基合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、優質血清目前，大多數合成培養基都需要添加血清。血清是細胞培養液中最重要的成分之一，含有細胞生長

生化檢測試劑盒的購買和使用注意事項2024/10/28

生化檢測試劑盒的購買和使用注意事項：1、、購買試劑盒前請弄清以下問題：·①根據取樣記錄，確認樣品情況。主要包括樣品的種類、數量和樣品保存狀況。②根據實驗設計或文獻報道，確認測定哪些指標。測定指標最好是成系列的，這樣便于得出明確結論，也好發表文章。·③提前了解所在實驗室的儀器設備情況，避免因為儀器設備不能滿足，造成試劑盒購買后無法使用。2、購買咨詢：①客戶提供檢測樣本對象、研究目的和測定指標，我們提供相關試劑盒的情況和所需儀器設備以及自備用品清單，確認哪些指標客戶能夠通過購買我們的試劑盒進行測定。

單核吞噬細胞系統包含有的細胞探討2024/10/21

單核吞噬細胞系統(mononeuclearphagocytesystem)又稱單核巨噬細胞系統，是高等動物體內具有強烈吞噬能力的巨噬細胞，及其前身細胞所組成的一個細胞系統，是機體防御結構的重要組成部分。單核吞噬細胞系統的細胞，有骨髓中的定向干細胞、原單核細胞、幼單核細胞，血液內的單核細胞和多種器官中的巨噬細胞。后者包括結締組織的巨噬細胞，肝的Kupffer細胞，肺的塵細胞，淋巴結和脾的巨噬細胞，胸膜腔和腹膜的巨噬細胞，神經組織的小膠質細胞以及骨組織的破骨細胞等。它們的特點是均來源于血中的單核細胞

ELISA實驗中洗滌不全現象解讀2024/10/14

酶聯免疫吸附測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，簡寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體特異性結合進行免疫反應的定性和定量檢測方法。ELISA實驗中洗滌不全現象：在ELISA實驗中，洗滌不徹di是一個常見問題，表現為在洗滌后仍能看到板孔中有殘留的液體或顆粒物。原因：1.洗滌液量不足或濃度不夠。2.洗滌次數不夠或洗滌時間不足。3.甩板力度不夠或甩板方式不當。解決方案：1.確保洗滌液量充足，并根據需要調整洗滌液濃度。2.增加洗滌次

細胞培養過程中各培養基特性2024/10/09

細胞培養，是人工創造與體內生長相似的環境，使細胞生長、繁殖并維持主要結構和功能的技術。培養基是一切體外培養的基礎，為細胞的生長和代謝活動提供了各種必需的營養物質。在細胞培養中，培養基是非常重要的因素之一。不同種類的細胞需要不同的培養基，因此選擇合適的培養基對于細胞培養的成功至關重要。一、DMEM培養基DMEM培養基是常用的培養基之一，它含有大量必需氨基酸、維生素和礦物質等營養物質，適用于培養各種類型的哺乳動物細胞。DMEM培養基還含有葡萄糖，可供細胞代謝使用。此外，DMEM還可以添加胎牛血清或其

PCR實驗RNA酶抑制劑介紹2024/09/29

下面介紹３種廣泛應用的特異性RNA酶抑制劑。1、RNA酶的蛋白質抑制劑是從人胎盤分離的一種蛋白質可與多種RNA酶緊密結合（KI≈3x1010）形成非共價結合的等摩爾復合物，使RNA酶失活。此蛋白質體內可能是血管生成素的抑制劑，血管生成素是氨基酸序列和推測的三級結構與胰RNA酶類似的一種血管生成因子，幾個廠家以不同的商品名出售這種抑制劑，該蛋白質應置于含5mmol/L二硫蘇糖醇（DTT）的50％甘油中，貯存于－20℃。抑制劑制品凍融數次后或放置在氧化條件下即應棄之不用，因為上述處理會使蛋白質變性從

ELISA免疫分析技術各測定法優缺點2024/09/24

ELISA是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。酶聯免疫吸附試驗的標準程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級檢測抗體（primarydetectionAb），形成一個抗原抗體的復合物。如果該抗體已經用酶（enzyme）標記了，即可用來直接測定抗原的量，若無，則可利用另一個酶標記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質（substrate），作用后產生出現的顏色深淺和樣本中的抗原